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技術(shù)文章

轉(zhuǎn)化細(xì)胞迅速解凍方法

閱讀:405          發(fā)布時間:2017-12-28

轉(zhuǎn)化細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟:
實驗前準(zhǔn)備:
1.將水浴鍋預(yù)熱至37℃
2.用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等
迅速解凍:
1.    迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化,時間控制在1分鐘左右
離心去除凍存液:
1.  融解好的細(xì)胞迅速放進(jìn)離心機(jī)中,2000r/min 或者600g離心2min
2.  吸棄上清液。
3.  用4-5ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,吹打制成單細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度以5×105/ml為宜。
4.  將復(fù)蘇好的轉(zhuǎn)化細(xì)胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi),8-24小時后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細(xì)胞生長情況而定。
lv丹(工業(yè)級混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品    1000mg/L于己烷,1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-04-5PAK    1000mg/L于丙酮,5 x 1ml
2-溴丙suan    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-04    1000mg/L于丙酮,1ml
敵草快    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-03    1000mg/L于乙suan乙酯,1ml
甲基毒死蜱    1000mg/L;1ml    嗪草酮/草克凈 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031004-01    1000mg/L于甲醇,1ml
四lv對苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品    50mg/L于甲醇,1ml    丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031003-05    100mg/L于甲醇,1ml
四lv對苯二甲suan 標(biāo)準(zhǔn)品    200mg/L于叔丁基甲mi,1ml    丁草胺 標(biāo)準(zhǔn)品    CDGG-031003-03-5PAK    100mg/L于叔丁基甲mi,5 x 1ml
轉(zhuǎn)化細(xì)胞

 

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