產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌（ETEC）核酸檢測試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法	48T	PCR檢測試劑盒

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

4-溴-3-氟甲分子式：189.02分子量： C7H6BrF英文名稱：4- -3- fluorideCAS號：452-74-4

乙酰丙酮鈷（III）分子式：356.26分子量： C15H21CoO6英文名稱：Cobalt (III)CAS號：21679-46-9

甲氧蟲酰分子式：368.47分子量： C22H28N2O3英文名稱：A methyl oxygenCAS號：161050-58-4

2-氯-5-硝-4-甲吡分子式：172.57分子量： C6H5ClN2O2英文名稱：2- -5- nitro -4-CAS號：23056-33-9

2,5-二氯-3-硝吡分子式：192.98分子量： C5H2Cl2N2O2英文名稱：2,5- two -3- nitro pyridineCAS號：21427-62-3

蒽醌英文名稱：AnthraquinoneCAS號：84-65-1分子式：208.22分子量： C14H8O2

1,2,4,5-四溴分子式：393.7分子量： C6H2Br4英文名稱：Four - 1,2,4,5-CAS號：636-28-2

2,3-二-5-羧四唑氯物分子式：302.72分子量： C14H11ClN4O2英文名稱：2,3- two phenyl -5- fourCAS號：2118-40-3

2,5-二辛-1,4-二-1-丙炔分子式：378.63分子量： C28H42英文名稱：2,5- two -1,4- two -1- octyl propargyl benzeneCAS號：336625-80-0

環(huán)黃芪英文名稱：Ring of AstragalusCAS號：84605-18-5分子式：490.71分子量： C30H50O5

酞菁鈷(II)英文名稱：Cobalt phthalocyanine (II)CAS號：3317-67-7分子式：571.47分子量： C32H16CoN8

產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測試劑盒方法Ube2B  泛素激活酶2B抗體 0.2ml

Phospho-PSD93 (Tyr340)  磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 0.1ml

NIK/MAPKKK14  NFkB誘導(dǎo)激酶抗體 0.1ml

DBF4B/ASKL1  S期激酶活化蛋白DBF4B抗體 0.2ml

PGC1 beta  過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml

Aurora A/ARK-1/AURKA  有絲分裂激酶A抗體 0.1ml

PAI1/PLANH1/Serpine 1  內(nèi)皮細胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 0.2ml

C20orf103  20號染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml

CAMKK2  鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 0.1ml

phospho-PIK3R1(Tyr467)  磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml

phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151)  磷酸化細絲蛋白A抗體 0.1ml

human serum  人血清抗體 0.2ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。