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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>非凋亡 DNAout24 次圖片

非凋亡 DNAout24 次圖片

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更新時(shí)間:2019-03-08 15:35:21瀏覽次數(shù):324

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 24 次
貨號(hào) GOY2491 主要用途 僅用于科研
非凋亡 DNAout24 次圖片在適條件下,DNA—CTAB 沉淀呈白色纖維狀,很容易一下子就從溶液中鉤出。不過,某些植物種的DNA 沉淀中可能含有雜質(zhì),特別是多糖,使DNA 沉淀呈絮狀或膠狀,這種情況下可能需要稍事離心才能得到DNA. —CTAB 沉淀。

詳細(xì)介紹

以下是非凋亡 DNAout24 次圖片的訂購信息!點(diǎn)擊了解公司更多產(chǎn)品

產(chǎn)品名稱非凋亡 DNAout24 次圖片
規(guī)格100mL
價(jià)格電詢

公司非凋亡 DNAout24 次圖片的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更RNA純化。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測(cè)系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
非凋亡 DNAout24 次圖片的詳細(xì)介紹:

非凋亡 DNAout24 次圖片DNA提取流程圖:

問:常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些?
稱答非凋亡 DNAout24 次圖片回收得到的DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得  DNA  純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長(zhǎng)段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:當(dāng)DNA段長(zhǎng)度較長(zhǎng)(5   kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
    1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
    2 由于長(zhǎng)段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
    3 減少操作過程中對(duì)長(zhǎng)段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。

非凋亡 DNAout24 次圖片注意事項(xiàng):
●溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。2-苯基丙烯酸    492-38-6    
2-溴-4,6-二甲基吡啶    4926-26-5    
1H-1,2,4-三氮唑-3-羧酸    4928-87-4    
4-羥基-2-甲基苯硼酸    493035-82-8    
L-焦谷氨酸甲酯    4931-66-2    
吖啶橙    494-38-2    
丙酰乙酸乙酯    4949-44-4    
4-(三氟甲氧基)苯基乙腈    49561-96-8    
非諾貝特    49562-28-9    
4-氰基苯磺酰氯    49584-26-1    
6-氯煙酸乙酯    49608-01-7    
2-氯煙酰氯    49609-84-9    
茚滿    496-11-7    
苯并呋喃-2-羧酸    496-41-3    
7-溴喹啉    4965-36-0    
3,4-二氨基甲苯    496-72-0    
5-氰基-3-吡啶基 硼 酸    497147-93-0    SNIP1    Smad核相互作用蛋白1抗體
Syntaxin 6    突觸融合蛋白6抗體
Sprouty1    軟脂?;椎鞍譙prouty1抗體
SH3TC2    脫髓鞘相關(guān)蛋白SH3TC2N抗體
SHANK2    富含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體
SHARPIN    線性泛素鏈相關(guān)蛋白SHARPIN抗體
SAMD7    SAMD7蛋白抗體
SAMD3    SAMD3蛋白抗體
非凋亡 DNAout24 次圖片Syntrophin gamma 2    肌蛋白結(jié)合蛋白γ2抗體
SOX22    核轉(zhuǎn)錄因子SOX22抗體
SOX4    核轉(zhuǎn)錄因子SOX4抗體
SUFU/Suppressor of Fused    抑制Hh信號(hào)通路蛋白SUFU抗體
SNAIL    Snail蛋白抗體
SARP1    分泌細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白1抗體
SMARCD3    肌動(dòng)蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子SMARCD3蛋白抗體
SLC25A6    線粒體載體腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體
SODD    Bcl2結(jié)合抗凋亡蛋白4抗體
C10orf27    第10號(hào)染色體開放閱讀框27抗體

 

操作步驟:
1非凋亡 DNAout24 次圖片切取含有目的DNA段的瓊脂糖凝膠條帶。
   ● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
   ● 切膠時(shí),請(qǐng)使用長(zhǎng)波長(zhǎng)UV  (360 nm )光盒。且不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2  稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
   ● 凝膠重量的稱量方法:取1.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個(gè)離心管的重量需單獨(dú)稱量。
3  按照每100 mg 瓊脂糖凝膠對(duì)應(yīng)100 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4  50 ℃水浴7-10min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
   ● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴(yán)重影響DN段的回收效率。
   ● 如果總體積大于500 µl,可適當(dāng)增加溶膠時(shí)間。
   ● 若此時(shí)溶液變紅,可加10 µl 3M NaAC  (pH 5.2)。
5  將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
   ● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因?yàn)榧兓谳^高溫度時(shí)結(jié)合DNA  的能力較弱。
6  12,000 rpm 離心1min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
   ● 此時(shí)DNA 片段被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7  加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液
8  加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液。
   ● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按1: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
   ● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 片段。
9  加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm,  離心1min,棄濾液。
10 12,000 rpm 離心  3min ,以*去除純化柱中的液體。
   ● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DNA 片段的充分溶解。
11  將離心柱置于新的1.5 ml 離心管中。向純化柱的中央處,懸空滴加30-100 µl 溶液Eluent  (60℃預(yù)熱),靜置2min 。12,000 rpm  離心1min,管底即為目的DNA 片段。貯存于-20℃。
   ● 溶液Eluent 可用無菌雙蒸水代替,但其pH 需為8.0-8.5,加入體積視DNA 目的片段的多少、用戶對(duì)目的片段濃度要求而定。
   ● 對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA 目的片段的產(chǎn)量。

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