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產(chǎn)品名稱 | 非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片 |
規(guī)格 | 100mL |
價格 | 電詢 |
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1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴增系列產(chǎn)品
6、克隆表達系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
圖片的詳細介紹:
非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片DNA提取流程圖:
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
稱答:非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片回收得到的DNA 可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:當DNA段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片注意事項:
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA 段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。鄰溴三氟甲氧基苯 64115-88-4
4--3-[[4-(3-吡啶基)-2-嘧啶基]氨基]苯甲酸 641569-94-0
3-(4-1H-咪唑-1-基)-5-(三)苯胺 641571-11-1
9-蒽甲醛 642-31-9
1,2-二氟-4-碘代苯 64248-58-4
3,4-二氟苯腈 64248-62-0
3,5-二氟苯甲腈 64248-63-1
2,5-二氟苯腈 64248-64-2
活性炭 64365-11-3
4-氟-3-甲 64465-53-8
苯基二氯化磷 644-97-3
1-碘-3-硝基苯 645-00-1
基甲酰氯 6452-47-7
6-氯喹啉-8-羧酸 6456-78-6
4-羥 6457-49-4
1,3-二氧戊環(huán) 646-06-0
4-酸 646-07-1
碘乙酸 64-69-7 體
C1orf177 1號染色體開放閱讀框177抗體
C1orf183 1號染色體開放閱讀框183抗體
Clenbuterol 克侖特羅/瘦肉精抗體
C6orf151 6號染色體開放閱讀框151抗體
C15orf52 15號染色體開放閱讀框52抗體
C2orf89 2號染色體開放閱讀框89抗體
CARD10 BCL10結(jié)合蛋白和激活核轉(zhuǎn)錄因子抗體
CARD15 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白15抗體
CLLD6 慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體
C13orf38 13號染色體開放閱讀框38抗體
C14ORF140 14號染色體開放閱讀框140抗體
CHAC2 陽離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)樣蛋白2抗體
非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片C15orf62 15號染色體開放閱讀框62抗體
C15orf41 15號染色體開放閱讀框41抗體
CNGA2 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體
硝酸銨 6484-52-2
操作步驟:
1 非凍型尿液 DNA 保存液100mL圖片切取含有目的DNA段的瓊脂糖凝膠條帶。
● 盡量切除不含有目的DNA 部分的凝膠,減少凝膠體積,提高DNA 回收率。
● 切膠時,請使用長波長UV (360 nm )光盒。且不要將DNA 長時間暴露在紫外燈下,以防DNA 損傷。
2 稱取凝膠的重量近似地確定其體積。
● 凝膠重量的稱量方法:取1.5 ml 離心管電子天平稱初質(zhì)量,切膠裝在離心管后稱終質(zhì)量,兩者差即為膠的質(zhì)量。不同離心管的重量可能有差異,因此,每個離心管的重量需單獨稱量。
3 按照每100 mg 瓊脂糖凝膠對應(yīng)100 µl 溶液BD 的比例,向離心管中加入溶液BD。
4 50 ℃水浴7-10min,直至凝膠*溶化。期間需要振蕩混合3 次。
● 瓊脂糖必須*融化,以免堵塞柱子,嚴重影響DN段的回收效率。
● 如果總體積大于500 µl,可適當增加溶膠時間。
● 若此時溶液變紅,可加10 µl 3M NaAC (pH 5.2)。
5 將步驟4 所獲溶液置于DNA 純化柱中,靜置2min 。
● 膠塊*溶解后將膠溶液溫度降至室溫再上柱,因為純化柱在較高溫度時結(jié)合DNA 的能力較弱。
6 12,000 rpm 離心1min。若溶液量大于DNA 純化柱的容積,可分兩次離心,棄濾液。
● 此時DNA 片段被吸附于DNA 純化柱中的硅膠膜上。
7 加入500 µl 溶液BD。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液
8 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液。
● 溶液PE 初次使用前用無水乙醇按1: 4 稀釋,即含80% 乙醇。
● 此步驟的作用是將硅膠膜上吸附的蛋白、鹽等雜質(zhì)洗脫,以獲得高質(zhì)量DNA 片段。
9 加入500 µl 溶液PE。12,000 rpm, 離心1min,棄濾液。
10 12,000 rpm 離心 3min ,以*去除純化柱中的液體。
● 此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DNA 片段的充分溶解。