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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 14:40:02瀏覽次數(shù)：395
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1231 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 外周血單核細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1231 |
商品介紹：
名稱 外周血單核細(xì)胞 2.組織來源：外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人外周血單核細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細(xì)胞起源于骨髓中的造血干細(xì)胞，并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進(jìn)入血液時仍然是尚未成熟的細(xì)胞。與其他血細(xì)胞比較，單核細(xì)胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶，并且具有更強的吞噬作用。單核細(xì)胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中，細(xì)胞體積繼續(xù)增大，直徑可達(dá)50-80μm，細(xì)胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多，成為成熟的細(xì)胞。固定在組織中的單核細(xì)胞稱為組織巨噬細(xì)胞，它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細(xì)胞和組織巨噬細(xì)胞能生成并釋放多種細(xì)胞毒、干擾素和白細(xì)胞介素，參與機(jī)體防衛(wèi)機(jī)制，還產(chǎn)生一些能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞生長的因子。在炎癥周圍單核細(xì)胞能進(jìn)行細(xì)胞分裂，并包圍異物。 5.方法簡介： 實驗室分離的人外周血單核細(xì)胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人外周血單核細(xì)胞經(jīng)CD14免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H182 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性半貼壁半懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形、巨噬細(xì)胞樣 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 COLEC10 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 DLL1 / Delta-like 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL1RL1 / ST2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 ANTXR2 / CMG2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 AMICA1 / JAML 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
外周血單核細(xì)胞4號染色體開放閱讀框28抗體Human SLC25A4(ADP/ATP translocase 1) ELISA Kit纖維素透析袋
陽離子通道相關(guān)蛋白2抗體Human PLEKHO1(Pleckstrin homology domain-containing family O member 1) ELISA Kit硬酯酸甲酯
陽離子通道相關(guān)蛋白3抗體Human GALC(Galactocerebrosidase) ELISA Kit趨化蛋白2（NAP-2/CXCL7）ELISA試劑盒,
液泡蛋白分選蛋白VPS13A抗體Human FAM214A(Protein FAM214A) ELISA Kit人β內(nèi)啡肽（β-EP）ELISA試劑盒,β-EP ELISA kit
鈣調(diào)B相關(guān)蛋白2抗體Human SERPINB13(Serpin B13) ELISA Kit人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體（sTfR）ELISA試劑盒,sTfR ELISA kit
CHRAC1蛋白抗體Human PTGDR(Prostaglandin D2 receptor) ELISA Kit人腺病抗原（ADV-Ag）ELISA試劑盒,ADV-Ag ELISA
ATP依賴的解螺旋抗體Human ABCA7(ATP-binding cassette sub-family A member 7) ELISA Kit人抗呼吸道合胞病抗體（RSV）ELISA試劑盒,RSV ELISA
X染色體開放閱讀框6抗體Human TCF3(Transcription factor E2-alpha) ELISA Kit人瘢痕性天皰瘡抗體（CP）ELISA試劑盒,CP ELISA
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