詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
牙髓干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1349 |
商品介紹:
名稱 牙髓干細(xì)胞 2.組織來源:牙髓組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人牙髓干細(xì)胞分離自滑膜組織;牙髓組織位于牙齒內(nèi)部的牙髓腔內(nèi)。牙髓腔的外形與牙體形態(tài)大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細(xì)小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經(jīng)、血管,淋巴和結(jié)締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質(zhì)細(xì)胞,其作用是造牙本質(zhì)。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機(jī)體抵抗力的差異,出現(xiàn)不同的病理變化,在臨床上會(huì)表現(xiàn)為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)后,轉(zhuǎn)化為急性牙髓炎癥。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人牙髓干細(xì)胞采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的人牙髓干細(xì)胞經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H231 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 Layilin / LAYN 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 Layilin / LAYN 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 Osteoprotegerin / TNFRSF11B 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IL10RA 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IFNA13 / Interferon alpha-13 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
牙髓干細(xì)胞Ralstonia eutropha血清淀粉樣蛋白A2檢測(cè)試劑盒
Lactobacillus casei血清淀粉樣蛋白A4檢測(cè)試劑盒
Burkholderia vesicularis信號(hào)素3E檢測(cè)試劑盒
Burkholderia gladioli血管緊張素Ⅲ檢測(cè)試劑盒
Burkholderia cepacia血管緊張素Ⅳ檢測(cè)試劑盒
Bifidobacterium animalis subsp. lactis血管緊張素Ⅴ檢測(cè)試劑盒
Burkholderia cepacia血管緊張素Ⅵ檢測(cè)試劑盒
Burkholderia gladioli血管緊張素Ⅶ檢測(cè)試劑盒