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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-18 15:22:56瀏覽次數(shù)：247
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0865 | 應用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 兔腸動脈內(nèi)皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0865 |
商品介紹：
名稱 兔腸動脈內(nèi)皮細胞 2.組織來源：腸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 兔腸動脈內(nèi)皮細胞分離自腸系膜動脈組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi)，分布于消化管的動脈。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈。前者主要分布于小腸左側(cè)，后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。內(nèi)皮細胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細胞，由一層扁平細胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細胞是沿著整個循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至最小的微血管。 5.方法簡介： 實驗室分離的兔腸動脈內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的兔腸動脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-Rb046 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣 傳代特性可傳1-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 CCL7 基因全長ORF克隆
小鼠 SERPINB3C 基因全長ORF克隆
小鼠 PLK1 基因全長ORF克隆
小鼠 SLAMF8 基因全長ORF克隆
小鼠 MET 基因全長ORF克隆
小鼠 CXCR4 基因全長ORF克隆
小鼠 CES2E 基因全長ORF克隆
小鼠 CTSH 基因全長ORF克隆
小鼠 PRKACA 基因全長ORF克隆
小鼠 TPST1 基因全長ORF克隆
兔腸動脈內(nèi)皮細胞結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂平板（9cm） 英文名稱：Violet Red Bile Agar 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
15.6-1000 pg/mL 人過氧化還原6(PRDX6) ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human CMRF35-like molecule 7
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Platelet basic protein
亮綠乳糖膽鹽培養(yǎng)液（BGB） 英文名稱：Brilliant Green Lactose Bile Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.56-100 U/L 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MGEA5)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Bone marrow proteoglycan
鹽緩沖稀釋液（ph7.2） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支
1.56-100 ng/ml 人組織蛋白C（CTS-C）ELISA試劑盒
細菌保存培養(yǎng)基 英文名稱：Bacterial Storage Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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