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大鼠外周血單核細胞

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更新時間:2022-04-22 14:50:23瀏覽次數(shù):232

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1238 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠外周血單核細胞的相關(guān)*:VZV(VARICELLA ZOSTER)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒 2次
通用型CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性檢測試劑盒 20次
細胞CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性檢測試劑盒 20次
組織CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性檢測試劑盒 20次
體液CMV(CYTOMEGALOVIRUS)病毒定性檢

詳細介紹

公司細胞現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱

大鼠外周血單核細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1238

產(chǎn)品介紹:

名稱    大鼠外周血單核細胞

2.組織來源:外周血

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

大鼠外周血單核細胞分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞,在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。單核細胞起源于骨髓中的造血干細胞,并在骨髓中發(fā)育。當(dāng)它們從骨髓進入血液時仍然是尚未成熟的細胞。與其他血細胞比較,單核細胞內(nèi)含有更多的非特異性脂酶,并且具有更強的吞噬作用。單核細胞在血液中停留2-3天后遷移到周圍組織中,細胞體積繼續(xù)增大,直徑可達50-80μm,細胞內(nèi)所含的溶酶體顆粒和線粒體的數(shù)目也增多,成為成熟的細胞。固定在組織中的單核細胞稱為組織巨噬細胞,它們經(jīng)常大量存在于淋巴結(jié)、肺泡壁、骨髓、肝和脾等器官。激活了的單核細胞和組織巨噬細胞能生成并釋放多種細胞毒、干擾素和白細胞介素,參與機體防衛(wèi)機制,還產(chǎn)生一些能促進內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞生長的因子。在炎癥周圍單核細胞能進行細胞分裂,并包圍異物。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠外周血單核細胞采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠外周血單核細胞經(jīng)CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R184

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)巨噬細胞樣

傳代特性不增殖;不傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

細胞特點及處理:

產(chǎn)品特點:

1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。

2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細胞處理:

1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時的注意事項:

1. 在冷凍保存之前,應(yīng)觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質(zhì),例如是否有雜細胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應(yīng)為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應(yīng)為試劑級等級,以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

4. 冷凍保存的細胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應(yīng)作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

 

下列是公司正銷售的產(chǎn)品:

 VIPR2 / VPAC2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SLC27A4 / FATP4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 SMR3B 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 Niemann-Pick disease type C2 / NPC2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 Ephrin-A4 / EFNA4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 FSH alpha / TSH alpha / CGA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

 Interferon alpha-B / IFNA8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 HER2 / ErbB2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠外周血單核細胞大鼠載脂蛋白A1Anti-RPL10L Antibody蛋白Z檢測試劑盒

大鼠載脂蛋白B100Anti-RPL17 Antibody蛋白Z依賴的蛋白抑制劑檢測試劑盒

Hpt/HP小鼠16α羥基雌酮1Anti-RPL15 Antibody蛋白多糖檢測試劑盒

人抗載脂蛋白抗體A1Anti-RPL12 Antibody蛋白激A檢測試劑盒

小鼠α1酸性糖蛋白Anti-RPL18 Antibody蛋白激C檢測試劑盒

大鼠25羥基3Anti-RPL14 Antibody蛋白激C-β1檢測試劑盒

人抗胰島素受體抗體Anti-RPL26L1 Antibody蛋白激檢測試劑盒

人抗胃壁抗體Anti-RPL27A Antibody蛋白檢測試劑盒

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

 


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