詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
小鼠神經少突膠質細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1243 |
商品介紹:
名稱 小鼠神經少突膠質細胞 2.組織來源:腦組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 小鼠神經少突膠質細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統(tǒng),在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協(xié)助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統(tǒng)脫髓鞘病變,還會引起神經元損傷或精神類疾病,甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統(tǒng)的白質的神經纖維束之間;②神經細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統(tǒng)的灰質區(qū),常位于神經細胞周圍,與神經細胞的關系密切,故又稱為神經細胞周衛(wèi)星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經系統(tǒng)內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是最為特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經發(fā)育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。 5.方法簡介: 實驗室分離的小鼠神經少突膠質細胞采用胰蛋白酶消化、混合細胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的小鼠神經少突膠質細胞經GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-M186 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性不增殖;不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 CD2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 PKM2 / OIP3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
GKN1 / Gastrokine 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CECR1 / ADA2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FSTL5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠神經少突膠質細胞腦特異性磷脂酸樣蛋白1抗體Human PARVG ELISA Kit2-異丁酸
跨膜蛋白TMEM176B抗體Human PARVA ELISA KitDL-2-丁酸
富含亮重復跨膜神經元蛋白2抗體Human PARVB ELISA Kit
富含亮重復跨膜神經元蛋白4抗體Human PBK ELISA Kit聚乙二醇1500
LZIC蛋白抗體Human PBX1 ELISA Kit無水碳酸鈉
Lgi3蛋白抗體Human PARVA ELISA Kit原兒茶醛
Lhx4蛋白抗體Human PBX3 ELISA Kit二氫歐山芹醇當歸酸酯
信號轉導分子SCDO3抗體Human PINP(N-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA Kit甜葉菊