化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠胃平滑肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1367 |
商品介紹：
名稱 小鼠胃平滑肌細(xì)胞 2.組織來源：胃組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠胃平滑肌細(xì)胞分離自胃組織；胃柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時形成許多皺襞，充盈時變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體（胃底腺、賁門腺、幽門腺），它們的分泌物混合形成胃液，對食物進(jìn)行化學(xué)性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成，外層縱形，中層環(huán)形，內(nèi)層斜行，其中環(huán)形肌，在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層，細(xì)胞通過緊密連接，進(jìn)行同步性運(yùn)動，完成肌肉的舒縮活動，以推動食物前進(jìn)，完成對食物的機(jī)械性消化，并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性，如興奮、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性，在離體后，置于適宜的環(huán)境內(nèi)，仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動，但其收縮很緩慢，節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對電刺激較不敏感，但對于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感，輕微的刺激?？梢饛?qiáng)烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的，胃內(nèi)容物對平滑肌的牽張、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M237 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD68 / Macrosialin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD47 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 REG1A / PSPS 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD59 / CD59A / MAC-IP 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD48 / SLAMF2 / BCM1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SCARB3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL20RB 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠胃平滑肌細(xì)胞內(nèi)皮受體蛋白激抗體Human INSM1(Insulinoma-associated protein 1) ELISA Kit氧化鋁H
蛋白激受體B2抗體Human HMGCS2 (Hydroxymethylglutaryl-CoA synthase, mitochondrial) ELISA KIT1，4-雙（5-苯基-2-惡唑）苯
化雌受體ER alpha 抗體Human INSM2 (Insulinoma-associated protein 2) ELISA KIT氟化鈰
重組增強(qiáng)型綠色熒光蛋白抗體Human HEMK1 (HemK methyltransferase family member 1) ELISA KIT人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ（TNFsR-Ⅱ）ELISA試劑盒,
雌受體α抗體（用于western blot）Human HRAS(GTPase HRas) ELISA Kit人抗IVIgG抗體ELISA試劑盒,
雌受體α/β抗體Human HSD17B1(Estradiol 17-beta-dehydrogenase 1) ELISA Kit人綠膿桿外素A（PEA）ELISA試劑盒,PEA ELISA KIT
自分泌運(yùn)動因子抗體Human IL1RL2 (Interleukin-1 receptor-like 2) ELISA Kit人白三烯C4（LTC4）ELISA試劑盒,LTC4 ELISA
蛋白激A3受體抗體Human UGT1A1(UDP-glucuronosyltransferase 1-1) ELISA Kit小鼠糖原化同工II（GP-II）ELISA試劑盒,
化工儀器網(wǎng)