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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 12:31:05瀏覽次數(shù)：212
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1183 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1183 |
商品介紹：
名稱 臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞 2.組織來源：臍帶血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞分離自臍帶血；臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn)，臍帶血中含有可以重建造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞，可用于造血干細(xì)胞移植；因此，臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源。臍帶血中含有大量的干細(xì)胞，干細(xì)胞是生命的種子，它會(huì)分化成機(jī)體的各種細(xì)胞，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、骨骼細(xì)胞等。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體；這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞，并具有造血支持、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓、脂肪組織、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長(zhǎng)因子，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用，可減輕移植物抗宿主?。?/span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞采用密度梯度離心法、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H165 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 ALK-6 / BMPR-IB 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SELPLG 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
ITLN2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
IGSF21 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
WT1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
ACTA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
MUC1 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
LOXL4 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
EGFL7 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
PRMT5 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞異丁基鋰 1.6M 正己烷溶液2--3-甲基吡 95%Anti-Annexin I/FITC 熒光素標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgG
（基硅烷）甲基化鋰 0.56 M in hexanes核黃素-5′-鈉鹽水合物 73-79%(HPLC)Anti-Annexin II/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白-2抗體IgG
基鋁 2.0 M 甲苯溶液核黃素鈉 93%Anti-Annexin III /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG
3-溴苯甲酸 98%核黃素鈉 USP級(jí)Anti-Annexin IV /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅳ抗體IgG
2,5-二溴苯甲酸 96%鹽酸去氧素 98%Anti-Annexin V/FITC 熒光素標(biāo)記重組膜粘連蛋白-5(人)抗體IgG
對(duì)氟苯甲酸 98%醋酸氯己定 98%Anti-Annexin VI/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 VI抗體IgG
對(duì)氟苯甲酸 99%,升華純化鹽酸洗必泰 96%Anti-Anopheles stephensi protein 1/FITC 熒光素標(biāo)記按蚊抗體IgG
3-氟苯甲酸 98%薯蕷皂素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>95%Anti-ANP/FITC 熒光素標(biāo)記抗心鈉肽（心鈉素）抗體IgG
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