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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠外周血淋巴細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1401 |
商品介紹：
名稱 大鼠外周血淋巴細(xì)胞 2.組織來源：血液組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是白細(xì)胞的一種，是體積最小的白細(xì)胞。其由淋巴器官產(chǎn)生，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系，按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細(xì)胞（又名T細(xì)胞）、B淋巴細(xì)胞（又名B細(xì)胞）和自然殺傷（NK）細(xì)胞。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞，它們的最初來源是相同的，都來自造血組織。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟。當(dāng)受抗原刺激后，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞，參與細(xì)胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等；而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再分化為漿細(xì)胞，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體），參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體，提呈抗原，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)，具有殺傷靶細(xì)胞的作用。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R310 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
KIR2DL1 / CD158a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Interferon alpha 10 / IFNA10 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Interferon alpha 7 / IFNA7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CRP / C-Reactive Protein 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Pepsinogen C / PGC 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AFP / alpha-fetoprotein 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Tie2 / TEK 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 BCAM 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Carboxypeptidase B2 / CPB2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠外周血淋巴細(xì)胞四氫噻唑 98%乳糖，無水 Ph Eur,USP,NF,JPFAS/CD95(Human Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 人凋亡相關(guān)因子
苯基-三[二甲基硅氧烷]硅烷 98%硬脂酸鎂 AR，Mg 4.0-5.0%CD62E(Human E-Selectin) ELISA kit 人E選擇素
烯酸四酯 98%,含500ppm單甲MEHQ穩(wěn)定劑硬脂酸鎂 USP，EPCCL1(Human Eotaxin 1) ELISA Kit 人嗜酸粒趨化蛋白
1,2-十四碳二 90%十二烷基鈉 Ph. Eur，USP級，92%ECF(Human eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 人鼠嗜酸粒趨化因子
5-氯-1.3.3-基-2-亞甲基啉 98%葡聚糖10 分子量10000EG-VEGF(Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor) ELISA Kit 人腺來源的血管內(nèi)皮生長因子
三辛 離子對試劑葡聚糖70 分子量 70000CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子
1,3,5-苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1mg/ml，基質(zhì)：甲,用于水分析葡聚糖40 分子量40000CD30(Human Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 人CD30分子
四丁基氫銨 離子對色譜葡聚糖5 分子量5000CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體1
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