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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0919 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
真/酵母NAD依賴(lài)性甘油醛-3-脫氫（NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase；NAD-GAPDH）活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 20次
植物
真/酵母NAD依賴(lài)性甘油醛-3-脫氫（NAD-Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase；NAD-GAPDH）活性光譜法定量檢測(cè)試劑盒 20次
植物
詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0919 |
商品介紹：
名稱(chēng) 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠腎小管上皮細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳酸氫鈉等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能，生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維D3、前列腺素、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱(chēng)為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠(yuǎn)端小管曲部也稱(chēng)為遠(yuǎn)曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞，腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要技術(shù)，目前該細(xì)胞分離方法有酶分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能：①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿；③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子，通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng)；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類(lèi)抗原，這說(shuō)明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深，腎小管上皮細(xì)胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型，在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小管上皮細(xì)胞采用先機(jī)械研磨過(guò)不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結(jié)合上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M062 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
小鼠 IGF-II 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Hgfac 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 HGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 bFGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CD16-2 / FCGFR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 FVII / F7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 sFRP-1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Frizzled-2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 EPOR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 FCGR2 / CD32 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠腎小管上皮細(xì)胞豆粉瓊脂 英文名稱(chēng)：Blood Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格：250g
TGE瓊脂 英文名稱(chēng)：TGE Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人S100-A10蛋白(Protein S100-A10)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Platelet-derived growth factor C
0.312-20 ng/mL 人蛋白抑制劑B6(Serpin B6)ELISA試劑盒
BTB培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：BTB，Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.56-100 ng/mL ELISA Kit for Pentosidine
0.312-20 ng/mL 人臂板蛋白-3G(SEMA-3G)ELISA試劑盒
78-5000 ng/mL 動(dòng)物源性成分(18S)核酸檢測(cè)試劑盒
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