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大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2022-04-19 15:39:35瀏覽次數(shù):219

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1017 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)*:細(xì)胞FYNT激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織FYNT激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞HCK激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織HCK激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
細(xì)胞IGF-1R激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次
組織IGF-1R激活性定量檢測試劑盒(A/B/C) 20次

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1017

商品介紹:

名稱    大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞   

2.組織來源:腦動脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介:

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞分離自腦動脈組織;腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán);靜脈系多不與同名動脈拌行,所收集的靜脈血先進入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈;各級靜脈都沒有瓣膜。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠腦動脈平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-R101

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

傳代特性可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

食蟹猴 LEFTY1 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CXCL9 基因全長ORF克隆

食蟹猴 IFNA4 基因全長ORF克隆

雪貂 IFNG 基因全長ORF克隆

雪貂 CD4 基因全長ORF克隆

雪貂 CD3E 基因全長ORF克隆

雪貂 CD20 / MS4A1 基因全長ORF克隆

雪貂 TNFA / TNF-alpha 基因全長ORF克隆

雪貂 CD8a / CD8 基因全長ORF克隆

食蟹猴 EPO 基因全長ORF克隆

大鼠腦動脈血管平滑肌細(xì)胞蠟樣芽孢桿菌成套生化鑒定管 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:7種*2套/盒*5盒

0.156-10 nmol/L ELISA Kit for Human Proto-oncogene c-Fos

78-5000 pg/mL 人乙酰脂(AChE)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人腎上腺素能a1A受體(ADRA1A)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Mdm2-binding protein

丙二酸鈉培養(yǎng)基 英文名稱:Malonate Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10

0.312-20 ng/mL 人透明質(zhì)酸3(Hyal-3)ELISA試劑盒

15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Natural resistance-associated macrophage protein 2

0.156-10 ng/mL 豬內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒(PERV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)

0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Serotonin N-acetyltransferase

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