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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠前列腺上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0925 |
商品介紹：
名稱 大鼠前列腺上皮細胞 2.組織來源：前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠前列腺上皮細胞分離自前列腺組織；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官；前列腺是不成對的實質性器宮，由腺組織和肌組織構成。前列腺如栗子，底朝上，與膀胱相貼，尖朝下，抵泌尿生殖膈，前面貼恥骨聯(lián)合，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過，扼守著尿道上口，所以，前列腺有問題時，排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的，具有內、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺每天分泌前列腺液，是構成精液主要成分；作為內分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關系密切，上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥，重度的前列腺炎患者的前列腺液內可檢測到脫落的上皮細胞，這是上皮細胞損傷的標志。炎癥發(fā)生時，與炎癥相關的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此，體外培養(yǎng)前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎。前列腺主要特征如下：①前列腺結構和功能活動均受雄性激素的調控；②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白（CK-5、CK-14），基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞；③前列腺上皮細胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學和激素性致癌作用提供了機會。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠前列腺上皮細胞采用先中性蛋白酶消化、后膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠前列腺上皮細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R064 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
甲型流感 H12N5 (green-winged teal/ALB/199/1991) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H5N3 (duck/Hokkaido/167/2007) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H4N6 (mallard/Ohio/657/2002) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H4N4 (mallard duck/Alberta/299/1977) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H3N8 (canine/New York/145353/2008) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H9N2 (Chicken/Hong Kong/G9/1997) 神經(jīng) (Neuraminidase / NA) 基因全長ORF克隆
甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體)
甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) NS1 基因全長ORF克隆
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, CRF07_BC) GP120 基因全長ORF克隆
類呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain A2) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化) (表達載體)
大鼠前列腺上皮細胞玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基顆粒 英文名稱：Rose Bengal Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Proenkephalin-B
3.12-200 U/L 人轉氨/谷丙轉氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Complement factor D
0.312-20 ng/mL 人Nesfatin1蛋白(Nesfatin-1)ELISA試劑盒
酵母粉葡萄糖氯瓊脂（YDC） 英文名稱：Yeast Extract Dextrose Chloramphenicol Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Tartrate-resistant acid phosphatase type 5
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Glypican-2
2×YT肉湯 英文名稱：2×YT Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人血管生成素相關蛋白7(Angiopoietin-related protein 7)ELISA試劑盒
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