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椎間盤纖維環(huán)細胞

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更新時間:2022-04-22 14:14:22瀏覽次數:263

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1210 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
椎間盤纖維環(huán)細胞的相關*:16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒
腸集聚型大腸埃希(Enteroaggregative E. coli)鑒定 20次
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒
腸侵襲性大腸桿(Enteroinvasive E. coli )鑒定 20次
16S rDNA PCR擴增檢測試劑盒
副溶血性弧Vibrio parahaemolyticus)鑒定 20

詳細介紹

產品介紹:

名稱    椎間盤纖維環(huán)細胞

2.組織來源:椎間盤組織

3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

椎間盤纖維環(huán)細胞分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環(huán)的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現,它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質內可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內質網和滑面內質網。細胞質內線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構造物質的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。

5.方法簡介:

實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯合消化法并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)細胞型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-H174

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO2,5%

公司細胞現貨供應,質量有保證、*、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供最新價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關操作說明。

產品名稱

椎間盤纖維環(huán)細胞

規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

貨號

GOY-01X1210

細胞特點及處理:

產品特點:

1、 使用方便:不需昂貴設備。

2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。

3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。

4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。

5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。

6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。

7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。

8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。

細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

QQ截圖20210907103850.png

 

細胞培養(yǎng)技巧:

一、凍存時的注意事項:

1. 在冷凍保存之前,應觀察細胞生長是否良好(log phase) 且存活率高,凍存的細胞密度為80 – 90 %最佳

2. 冷凍前檢測細胞是否保有其*性質,例如是否有雜細胞或者支原體等。

3. 使用的DMSO 應為試劑級等級,以5~10 ml 小體積分裝,4 度避光保存,勿作多次解凍。使用的甘油也應為試劑級等級,以高壓蒸汽

滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。

4. 冷凍保存的細胞濃度:

4-1. 正常的成纖維細胞: 1-3x 10^6 cells/ml

4-2 雜交瘤細胞: 1~3 x 10^6 cells/ml,細胞濃度不要太高,某些雜交瘤會因冷凍濃度太高而在解凍24 小時后。

4-3.貼壁腫瘤細胞: 1 x 10^6,依細胞種類而異。腺癌類的細胞解凍后須較高之濃度,而HeLa 只需1-3 x 10^6 cells/ml。

4-4. 懸浮細胞: 5~10 x 10^6 cells/ml, 而淋巴類細胞須至少5 x 10^6 cells/ml。

5. 冷凍保護劑濃度為5 %10 DMSO,若是不確定細胞之冷凍條件,在做冷凍保存之同時,亦應作一個backup culture,以防止冷凍失敗。

 

使用方法:

收到細胞后,請按照以下方法進行操作。

1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3. 細胞傳代

1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;

2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入*培養(yǎng)液終止消化;

3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:21:3等適當的比例進行接種傳代,然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

4) 待細胞*貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

 

下列是公司正銷售的產品:

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 BMF / Bcl2 modifying factor ELISA配對抗體

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 IGFBP3 ELISA配對抗體

 GM-CSF / CSF2 ELISA配對抗體

 Cystatin B / CSTB ELISA配對抗體

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肌球蛋白XVIIIb抗體Human NUP93 ELISA Kit異阿魏酸

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T成熟相關蛋白抗體Human Nurr1/NR4A2 ELISA Kit色


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