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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-24 09:58:06瀏覽次數(shù)：311
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1373 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠腦膜成纖維細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1373 |
商品介紹：
名稱 小鼠腦膜成纖維細(xì)胞 2.組織來源：腦膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠腦膜細(xì)胞分離自腦膜組織；腦膜是顱骨與腦間的隔膜，一共有三層，由外向內(nèi)為硬腦膜、蛛網(wǎng)膜和軟腦膜。腦膜細(xì)胞圍繞著大腦，參與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的正常發(fā)育，能穩(wěn)定腦軟膜表面的細(xì)胞外基質(zhì)、組織放射狀膠質(zhì)細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)和小腦皮層分層結(jié)構(gòu)。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠腦膜成纖維細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠腦膜成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M239 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 CD24 / Ly-52 / CD24A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 GPNMB / Osteoactivin 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
C7 / Complement component 7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRG1-beta 1 (ECD) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
/ 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
B7-H4 / B7S1 / B7x 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL23R / IL23 Receptor 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 Ephrin-A5 / EFNA5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠腦膜成纖維細(xì)胞L-α-磷脂酰-β-花生四烯酰-γ-硬脂酰 10 mg/mL 氯,即1ml大黃素甲 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr412) 化非受體激c-Abl抗體
氫鈉銨 AR大黃酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr245) 化非受體激c-Abl抗體
3-噻吩-2-羧酰 97%青藤堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%Anti-phospho-c-Abl(Tyr204) 化非受體激c-Abl抗體
4--2，6-二氯吡 97%青藤堿 97%Anti-phospho-c-Abl(Thr735) 化非受體激c-Abl抗體
8-芘-1，3，6-三磺酸三鈉鹽 熒光級(-)-莽草酸 98%Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) 化非受體激c-Abl抗體
4-苯甲脒 97%(-)-莽草酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Anti-ABL2 ABL2蛋白抗體
4-喹哪 98% 98%Anti-ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗體
2-辛酸 98%鹽酸坦索羅辛 98%Anti-ABP 雄結(jié)合蛋白抗體
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