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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠外周血單個核細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1253 |
商品介紹：
名稱 小鼠外周血單個核細胞 2.組織來源：外周血 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠外周血單個核細胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞（PBMC）即外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離出不同的細胞。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠外周血單個核細胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠外周血單個核細胞經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M190 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
KIAA1279 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ADA / Adenosine deaminase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
RIOK1 / RIO kinase 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ECD / Ecdysoneless homolog 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CHST11 / C4ST-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) Nucleocapsid / NP 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
狗 XCL1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 EphA3 (aa 569-984) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠外周血單個核細胞乙基苯 AR,98.5% 色素C 95%Anti-FGF4/HSTF1/HBGF-4/FITC 熒光素標記纖維母生長因子4抗體IgG
乙基苯 >99.5%(GC)聚烯 熔融指數(shù) 0.5g/10minAnti-FGF5/FITC 熒光素標記纖維母生長因子5抗體IgG
草酸 CP，99.5%聚烯 熔融指數(shù) 4g/10minAnti-KGF/FGF-7/FITC 熒光素標記角質(zhì)形成生長因子受體/纖維母生長因子-7抗體IgG
草酸 GR，99.8%聚烯 熔融指數(shù) 12g/10minAnti-FGF-8/HBGF-8/FITC 熒光素標記成纖維生長因子-8/纖維母生長因子-8抗體IgG
2-氯 98%聚烯 熔融指數(shù) 35g/10minAnti-FGF-13/FITC 熒光素標記抗纖維母生長因子-13抗體IgG
1,10-癸二 98%聚烯 熔融指數(shù) 2.2g/10minAnti-FGF-10/FITC 熒光素標記成纖維生長因子-10/纖維母生長因子-10抗體IgG
十二烷二酸 99%聚烯 熔融指數(shù) 0.3g/10min (1.3 @5kg Anti-bFGF-R/FGFR1/FITC 熒光素標記纖維母生長因子受體1抗體IgG
1,2-十六烷二 95%氯化金(III) 水合物 Au ≥48%Anti-PLCG 1/PLC gamma 1/FITC 熒光素標記磷酯Cγ1抗體IgG
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