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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 11:48:20瀏覽次數(shù)：243
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1157 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠角膜基質(zhì)細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1157 |
商品介紹：
名稱 小鼠角膜基質(zhì)細胞 2.組織來源：眼角膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠角膜基質(zhì)細胞分離自眼角膜組織；角膜位于眼球前壁的一層透明膜，約占纖維膜的前1/6，從后面看角膜呈正圓形，從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同，中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢，如有外物接觸角膜，眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明，角膜并沒有血管，透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層，由前向后依次為：上皮細胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分，占據(jù)角膜厚度的90%，由角膜基質(zhì)細胞、膠原纖維和細胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細胞的增殖及分泌細胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整，透明度高的特點，正常情況下角膜基質(zhì)細胞分泌組成基質(zhì)層的成分，維持角膜的透明度，此細胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細胞，存在于角膜基質(zhì)層中，在正常情況下，處于靜止狀態(tài)。但當角膜損傷時，不同上皮來源的因子及環(huán)境信號，將影響角膜基質(zhì)細胞的應(yīng)答反應(yīng)，決定著角膜能否*被修復(fù)。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠角膜基質(zhì)細胞采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠角膜基質(zhì)細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M154 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PAH 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
小鼠 IFITM1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
NR2C2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
P53 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
小鼠 Smad3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
ErbB2 / HER2 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠 SDC4 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
Dkk1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽
CXCR7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
EpCAM / TROP1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠角膜基質(zhì)細胞15.6-1000 pg/mL 藍舌病病毒(BTV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
1.56-100 ng/mL 人RNA聚合轉(zhuǎn)錄中介亞基31( Mediator of RNA polymerase II transcription subunit 31)ELISA試劑盒
0.39-25 ng/mL ELISA Kit for Human Glutamate decarboxylase 1
瓊脂培養(yǎng)基B 英文名稱：Agar medium B (Casein soya bean digest agar) 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人層粘連蛋白β4(LAMβ4)ELISA試劑盒
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液顆粒 英文名稱：Lactose Peptone Broth 產(chǎn)品規(guī)格：300ml/袋*10
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（2015藥典） 英文名稱：Violet Red Bile Glucose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
C81V培養(yǎng)基 英文名稱：C81V Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
78-5000 pg/mL 人VGF神經(jīng)生長因子誘導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130
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