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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 16:01:51瀏覽次數(shù)：276
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1029 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 表皮黑色素細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1029 |
商品介紹：
名稱 表皮黑色素細(xì)胞 2.組織來(lái)源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人表皮黑色素細(xì)胞分離自皮膚組織；表皮位于動(dòng)物皮膚的外層，由胚胎時(shí)期外胚層形成，具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu)，由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層，即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞，起源于神經(jīng)嵴，后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細(xì)胞的異常或功能的失常導(dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生，如、黃褐斑等。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層，與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位，其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護(hù)皮膚免受損害。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素細(xì)胞先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮黑色素細(xì)胞經(jīng)S-100免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H108 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CD247 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SLC4A1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TLR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 FZD9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ENPEP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TLR9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 IL1A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ART1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 ICOS 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CD276 基因全長(zhǎng)ORF克隆
表皮黑色素細(xì)胞0.78-50 ng/mL 人凝溶膠蛋白(GS)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人活性氧調(diào)制因子1 (ROS modulator 1)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 脂氧素B4(Lipoxin B4)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 蠶微粒子病(NB)核酸檢測(cè)試劑盒
0.156-10 ng/mL 人源性激肽釋放結(jié)合蛋白 ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 戊糖素(Pentosidine)ELISA試劑盒
劉榮標(biāo)氏鞭毛染色液 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：5ml*8
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lymphotoxin-alpha
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cathepsin L2
0.625-40 ng/mL 人磷脂A2受體（PLA2R）ELISA試劑盒
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