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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠腸道干細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1161 |
商品介紹：
名稱 大鼠腸道干細(xì)胞 2.組織來源：腸組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠腸道干細(xì)胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)?，形成糞便，再通過直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸道干細(xì)胞（ISC）也稱腸道上皮干細(xì)胞，主要位于腸黏膜隱窩內(nèi)，其與腸道黏膜上皮的更新和修復(fù)密切相關(guān)。正常情況下，位于隱窩基底部的腸道干細(xì)胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個(gè)遷移過程大約3-5d，在遷移過程中腸道干細(xì)胞分化形成不同的腸黏膜細(xì)胞。當(dāng)受到外界生理或病理信號作用時(shí)，ISC可持續(xù)增殖、分化為成熟腸上皮細(xì)胞，如腸型細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞和潘氏細(xì)胞等，從而維持腸道黏膜結(jié)構(gòu)和功能的穩(wěn)定性。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸道干細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化后，用腸道干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸道干細(xì)胞經(jīng)MSI-1免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R155 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)球形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
小鼠 FGF12 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶HA標(biāo)簽
小鼠 CHK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CHK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/Xinjiang/1/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/chicken/India/NIV33487/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/R0405050/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
大鼠腸道干細(xì)胞皮質(zhì)素1抗體Human GLP2(Glucagon Like Peptide 2) ELISA Kit大鼠E選擇素（E-Selectin/CD62E）ELISA試劑盒,
8號染色體開放閱讀框70抗體Human GLUT2(Glucose Transporter 2) ELISA Kit豬傳染性胃腸炎病抗體（TGEV）ELISA試劑盒,
胰羧肽E抗體Human GKN1(Gastrokine 1) ELISA Kit兔抗平滑肌抗體（ASMA） ELISA試劑盒,
化角蛋白18抗體Human GLUT4(Glucose Transporter 4) ELISA Kit兔功能相關(guān)抗原3（LFA-3/CD58）ELISA試劑盒,
20號染色體開放閱讀框112抗體Human GM-CSF Ab(Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit魚類狀腺原（T3）ELISA試劑盒,
10號染色體開放閱讀框88抗體Human Glyoxalase I(GLO1) ELISA Kit抗乙型肝炎病核心IgM抗體（HBcAb-IgM）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人
富含半胱C端蛋白1抗體Human GNβ1(G Protein Beta 1) ELISA Kit膽硫乳瓊脂（DHL）
E1A激活基因激蛋白2抗體Human GP-73(Golgi Protein 73) ELISA Kit麥芽浸膏湯 用于酸性罐頭食品商業(yè)無檢驗(yàn)
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