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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-19 12:59:10瀏覽次數(shù)：220
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0941 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠尿道上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0941 |
商品介紹：
名稱 大鼠尿道上皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：尿道組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道。尿道上皮細(xì)胞主要功能：①尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成；②上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸，它們具有多種防御機(jī)制來(lái)阻止病原體粘著，保持泌尿器溶解物的不滲透性；③膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體，上皮生長(zhǎng)因子受體和纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體，在損傷和感染時(shí)，這些受體對(duì)膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用；④能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠尿道上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R070 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 RAC2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 KRT14 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SRI 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 SFR1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 NAPA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 GNPDA1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 GTPBP5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PPT2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PLBD1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 G6PC 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠尿道上皮細(xì)胞0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測(cè)試劑盒
大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基USP 英文名稱：Tryptose Soya Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Parvalbumin alpha
0.39-25 ng/mL 人解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)ELISA試劑盒
抗生素檢測(cè)培養(yǎng)基II 英文名稱：Antibiotic Agar No.2 產(chǎn)品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL 前列腺素E2(Prostaglandin E2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測(cè)試劑盒
0.156-10 ng/mL 人五聚素3(PTX3)ELISA試劑盒
培養(yǎng)基（蛋白胨水） 英文名稱：Indole Medium 產(chǎn)品規(guī)格：10g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2
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