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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠虹膜色素上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1061 |
商品介紹：
名稱 大鼠虹膜色素上皮細胞 2.組織來源：眼球 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠虹膜色素上皮細胞分離自眼球虹膜組織；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分，屬于眼球中層，位于血管膜的最前部；在睫狀體前方虹膜，中心有一圓形開口，稱為瞳孔，猶如相機當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強烈時，虹膜會收蹜，只使一小束光線穿透瞳孔，進入眼睛；當(dāng)進入黑暗環(huán)境中，虹膜就會往后退縮，使瞳孔變大，讓更多的光線進入眼睛，多數(shù)的脊椎動物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細胞之一，位于虹膜組織的后面，和視網(wǎng)膜色素上皮細胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠虹膜色素上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠虹膜色素上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R118 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 TIMP1 基因全長ORF克隆
大鼠 TEK / Tie2 基因全長ORF克隆
大鼠 PRLR 基因全長ORF克隆
大鼠 APCS / SAP 基因全長ORF克隆
大鼠 CXCL5 基因全長ORF克隆
大鼠 LCN2 / NGAL 基因全長ORF克隆
大鼠 CXCL10 基因全長ORF克隆
食蟹猴 CD31 / PECAM1 基因全長ORF克隆
食蟹猴 FCGRT 基因全長ORF克隆
食蟹猴 YWHAB 基因全長ORF克隆
大鼠虹膜色素上皮細胞7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 1
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, B-27 alpha chain
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人二核苷激A(NDK A)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
1/2MS培養(yǎng)基 英文名稱：1/2MS Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.25-80 ng/mL ELISA Kit for Human Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3
0.625-40 ng/mL 人層粘連蛋白β2(LAMβ2)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein ERGIC-53
YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱：YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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