詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1425 |
商品介紹:
名稱 大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞 2.組織來源:關節(jié)軟骨組織 3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介: 大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞分離自顳下頜關節(jié)軟骨組織,顳下頜關節(jié)又稱顳頜關節(jié)"或下頜關節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關節(jié)結節(jié)組成,左右合成一聯(lián)合關節(jié),主理張口閉口和咀嚼運動。關節(jié)囊松弛,側方為內、外側韌帶所加強。囊內的關節(jié)盤呈卵圓形,由纖維軟骨組成,區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀,前凹后凸,與關節(jié)結節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對應;下面凹正對下頜頭,周緣與關節(jié)囊相接,前緣與穿過關節(jié)囊的翼外肌腱相連。關節(jié)盤將關節(jié)腔分成上、下兩半。關節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關節(jié)軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,其底端緊緊附著在下面的骨質上,上端朝向關節(jié)面,這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來,同時當受到壓力時候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經支配,也沒有血管,其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得,而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中,關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動,使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與關節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內,這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質內有大量的粗面內質網和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中,關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡介: 實驗室分離的大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞采用膠原酶聯(lián)合中性蛋白酶消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 實驗室分離的大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞經Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R324 換液頻率每3-4天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右;3代以內狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5% |
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MICA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD32b / FCGR2B 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
EPOR & CD131 Homodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FLRT2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CRP / C-reactive 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SECTM1 / K12 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FAM3D 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SerpinA6 / CBG 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H1N1 (A/New York/18/2009) HA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞1號染色體開放閱讀框163抗體Human FAM164C ELISA Kit人α乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框172抗體Human EYA4 ELISA Kit小鼠轉氨/谷丙轉氨(ALT/GPT)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框2抗體Human EYA3 ELISA Kit小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框19抗體Human EZH1 ELISA Kit小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框25抗體Human EXOSC2 ELISA Kit大鼠白介素1(IL-1)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框31抗體Human F4/80 ELISA Kit大鼠組織型纖溶原激活劑(t-PA) ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框51抗體Human EYA1 ELISA Kit大鼠3(VD3)ELISA試劑盒,
1號染色體開放閱讀框52抗體Human EYA3 ELISA Kit大鼠FMS樣激3配體(Flt3L)ELISA試劑盒,