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研究利器ImageXpress Pico開啟小兒呼吸道感染研究大門
| 重磅：：科學(xué)家使用ImageXpress Pico證實在急性呼吸道病毒感染中，富含ha的ECM的形成促進了促炎癥環(huán)境的形成。ImageXpress Pico本身具有高分辨率成像功能和強大的分析能力，加上其緊湊小巧的設(shè)計風(fēng)格正是 “小身材，大能耐”的真實寫照。 |
| 西雅圖兒童研究所*席研究員，西雅圖兒童醫(yī)院肺科和睡眠內(nèi)科主治醫(yī)師Stephen R. Reeves博士說：“ImageXpress Pico系統(tǒng)使我們的團隊能夠準(zhǔn)確有效地評估肥大細(xì)胞與RSV感染的人肺成纖維細(xì)胞（HLFs）的結(jié)合特性，并更好地了解RSV的炎癥反應(yīng)。 |
| 研究挑戰(zhàn)——了解RSV感染的HLFs外基質(zhì)中肥大細(xì)胞（mast cells）和透明質(zhì)酸（hyaluronan，HA）的結(jié)合特征 呼吸道合胞病毒(RSV)是世界范圍內(nèi)感染兒童*常見的病毒之一。病毒的輕度病例僅限于上呼吸道(鼻子和喉嚨)炎癥；更嚴(yán)重的病例會延伸到下呼吸道(支氣管和肺)，并伴有咳嗽、低燒和食欲不振。 |
| 更嚴(yán)重的RSV感染可發(fā)展為肺炎、呼吸衰竭和或死亡。RSV具有高度傳染性，主要影響兒童。然而，成年人和那些免疫系統(tǒng)較弱的人也易被影響。RSV的癥狀和傳播與影響上呼吸道和下呼吸道的其他病毒類似，包括甲型和乙型流感病毒、鼻病毒、腺病毒以及冠狀病毒株COVID-19。 更多地了解這些病毒的潛在機制有助于闡明潛在的治療方案。西雅圖兒童研究所、華盛頓大學(xué)和貝納羅亞研究所的研究人員著手研究RSV的一種潛在機制。 |
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| Stephen Reeves博士和他的伙伴設(shè)計了幾個實驗來確定RSV感染的HLFs中肥大細(xì)胞和HA之間相互作用的下游炎癥效應(yīng)。為此需要用活細(xì)胞和固定的細(xì)胞做細(xì)胞熒光成像來測試摸索一系列的條件，包括包括HA在細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)中的位置和作用機制，肥大細(xì)胞蛋白表達(dá)，以及HA、肥大細(xì)胞和ECM之間的分子相互作用。傳統(tǒng)的熒光顯微鏡成像需要使用玻璃蓋片對細(xì)胞進行固定，這將浪費更多的時間。Reeves博士和他的團隊需要一種更有效的方式去更有效的獲得高質(zhì)量的活細(xì)胞和固定組織圖像。 |
| 解決方法——高分辨率的活細(xì)胞和固定細(xì)胞熒光成像和分析 研究團隊選擇了ImageXpress®Pico自動細(xì)胞成像系統(tǒng)，因為其易用性、靈活性和強大的分析能力。 |
| 分析方法 為了幫助該團隊快速開展實驗，我們的現(xiàn)場應(yīng)用科學(xué)家和技術(shù)支持專家為不同的分析提供了現(xiàn)場培訓(xùn)和支持。這包括了實驗方案和動態(tài)分析，這樣就可以同時成像和分析。 |
| 圖像獲取研究小組進行了活細(xì)胞成像，然后固定組織，對細(xì)胞外基質(zhì)成分進行染色，而這些成分在活細(xì)胞中是不可視的。在ImageXpress Pico用多孔板進行成像，減少了與樣品處理相關(guān)的時間。圖像采集過程中，大面積的感興趣區(qū)域可以通過高倍鏡下的拼接模式獲取。這樣的成像方式既減少了額外的熒光顯微鏡重復(fù)驗證工作，同時還可以得到高質(zhì)量圖片。 |
結(jié)果分析Reeves博士和他的伙伴能夠定量分析肥大細(xì)胞和感染了RSV的HLFs的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)之間的相互作用，圖片和分析數(shù)據(jù)如下：  |
| ImageXpress Pico系統(tǒng)還用于分析RSV感染的HLFs在48小時內(nèi)TSG-6的表達(dá)和肥大細(xì)胞粘附的影響。 圖片和分析數(shù)據(jù)如下：（注：TSG-6是一種與炎癥相關(guān)的蛋白，在RSV感染的細(xì)胞中表達(dá)上調(diào))。 |
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| ImageXpress Pico自動細(xì)胞成像系統(tǒng) 產(chǎn)品使用 ImageXpress Pico是一個穩(wěn)定的、可靠的自動細(xì)胞成像系統(tǒng)，適于實驗臺面操作 。這臺儀器專為個體生物實驗室或高通量篩選應(yīng)用而設(shè)計，其緊湊的設(shè)計風(fēng)格結(jié)合了儀器本身高分辨率成像功能和強大的分析能力給到客戶所有層面的成像體驗。基于細(xì)胞分析，系統(tǒng)擁有強大的預(yù)設(shè)程序模板，以及先進的功能，如數(shù)字共焦。無論您是在做固定細(xì)胞或活細(xì)胞的熒光或明場成像，只需單擊幾下鼠標(biāo)就可以開始成像和生成數(shù)據(jù)。 |
| 結(jié)果高質(zhì)量的數(shù)據(jù)有助于科學(xué)取得更快的突破 Reeves博士使用ImageXpress Pico*證實： l 在感染RSV的兒童捐贈者來源的HLFs中，HA的合成更強，從而產(chǎn)生富含HA的細(xì)胞外基質(zhì)(ECM) l 富含HA的ECM促進肥大細(xì)胞更強的黏附，增加肥大細(xì)胞蛋白酶的釋放，導(dǎo)致炎癥反應(yīng)(如氣道收縮、粘液生成、咳嗽) l RSV感染的HLFs表現(xiàn)出肥大細(xì)胞炎癥介質(zhì)的表達(dá)增加，以及肥大細(xì)胞黏附增加 研究結(jié)果表明，在急性呼吸道病毒感染中，富含ha的ECM的形成促進了促炎癥環(huán)境的形成。這一機制對RSV等呼吸道病毒的干預(yù)治療具有深遠(yuǎn)的意義。 |
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| 總結(jié)：研究總結(jié):該研究表明，感染RSV的HLFs誘導(dǎo)了合成HA的酶的上調(diào)(HAS 2和3)，同時下調(diào)了分解HA的酶(HYAL 2)，這導(dǎo)致了細(xì)胞外基質(zhì)中HA的增加和肥大細(xì)胞的粘附。此外，RSV感染的HLFs顯示TSG-6表達(dá)增加，增強了肥大細(xì)胞與ECM的結(jié)合。與RSV誘導(dǎo)的ECM結(jié)合的肥大細(xì)胞可以上調(diào)肥大細(xì)胞蛋白酶的表達(dá)，促進促炎癥環(huán)境的形成。 |
| Stephen R. Reeves博士認(rèn)為：“ImageXpress Pico系統(tǒng)不斷改進以滿足我們不斷變化的需求，并為進一步的發(fā)現(xiàn)打開了大門。我們很期待接下來會發(fā)生什么!” Reeves博士和其他通訊作者是Dr. Jason Debley實驗室成員的一部分。Debley實驗室利用流行病學(xué)、臨床和分子方法來了解兒童早期哮喘的進化，并研究在兒童哮喘中氣道上皮的作用。西雅圖兒童研究所免疫和免疫療法中心的研究人員調(diào)查了一些影響人類免疫系統(tǒng)的*具挑戰(zhàn)性的兒童疾病。終的目標(biāo)是利用免疫學(xué)的治療力量來設(shè)計新的疾病治療方法。 |