目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>免疫學(xué)試劑>>WB常用試劑>> abs9247EDTA抗原修復(fù)液
CAS | - | 純度 | 濃度50× |
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分子量 | - | 分子式 | - |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100ml |
貨號 | abs9247 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 石蠟切片;冰凍切片;細(xì)胞爬片等 |
產(chǎn)品描述:
細(xì)胞或組織用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后,會導(dǎo)致蛋白之間的交聯(lián)(cross-link),遮蔽樣品的抗原位點(diǎn),導(dǎo)致免疫染色時染色信號減弱,甚至出現(xiàn)一些假陽性染色結(jié)果。EDTA抗原修復(fù)液(50×)(EDTA Antigen Retrieval Solution (50×))采用了廣泛使用的EDTA,可以有效去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián),充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
通常石蠟切片都需進(jìn)行抗原修復(fù)處理,而冰凍切片可以不進(jìn)行抗原修復(fù)處理??乖迯?fù)會大大改善石蠟切片的免疫染色效果,但對于冰凍切片的染色效果很多文獻(xiàn)資料表明也有顯著改善。特別是當(dāng)冰凍切片免疫染色效果欠佳時,可以考慮嘗試進(jìn)行抗原修復(fù)。從原理上來看,無論冰凍切片還是細(xì)胞爬片等,只要是用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定的樣品,進(jìn)行抗原修復(fù)都會有效去除蛋白之間的交聯(lián),充分暴露抗原表位,從而大大改善免疫染色效果。
使用方法:
1、石蠟切片:
(1)脫蠟:切片在二甲苯中脫蠟 2×5min。無水乙醇 2×5min。90%乙醇 2×5min,70%乙醇 5min。蒸餾水 2×5min。
(2)抗原修復(fù):將切片浸泡在抗原修復(fù)液(1×)中,95-100℃加熱約 10-20min(最佳的加熱時間需根據(jù)不同的樣品和目的蛋白自行摸索)。抗原修復(fù)液(1×)使用前需預(yù)熱到 95-100℃。加熱可以使用水浴鍋或微波爐。如果使用微波爐加熱,需注意避免修復(fù)液暴沸。隨后大約在 20-30min 冷卻至室溫。用免疫染色洗滌液洗滌 1-2 次,每次 3-5min。即可進(jìn)行封閉等后續(xù)的免疫染色步驟。
2、冰凍切片:
用免疫染色洗滌液洗滌切片 5min??乖迯?fù)的過程如石蠟切片的抗原修復(fù)過程。
3、其它樣品的抗原修復(fù),可以參考石蠟切片的步驟進(jìn)行。
注意事項(xiàng):
1、EDTA 抗原修復(fù)液(50×)使用前必須用重蒸水或 MilliQ 水稀釋 50 倍,配制成抗原修復(fù)液(1×)。
2、為了您的自身安全,使用試劑前,請做好防護(hù),如穿實(shí)驗(yàn)服,戴手套等。
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