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檢測原理：

Mouse VEGF ELISA Kit 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗小鼠 VEGF抗體預(yù)包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的VEGF與固相抗體和檢測抗體結(jié)合，形成免疫復合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應(yīng)，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預(yù)包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

Mouse VEGF ELISA Kit 試劑盒組分：

預(yù)包被96孔板、標準品、抗小鼠 VEGF檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：1.8 pg/mL

檢測范圍：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范圍：82-110%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

血管內(nèi)皮生長因子(VEGF 或 VEGF-A)，又叫血管通透因子(VPF)，是一種針對胎兒和成 人的血管新生和血管生成的有效調(diào)節(jié)因子。血管內(nèi)皮生長因子屬于 PDGF 家族，該 家族蛋白的特點是存在 8 個保守的胱氨酸結(jié)點和通過反向平行二硫鍵結(jié)合的二聚體(4)。 經(jīng)過選擇性剪切，VEGF 剪接體有不同的氨基酸長度。小鼠有 VEGF120、VEGF164、 VEGF188；人的 VEGF 有 VEGF121、VEGF145、VEGF164、VEGF183、VEGF189 和 VEGF206。VEGF165 是人的表達量最高、活性*的一種亞型，其次是 VEGF121 和 VEGF89。小鼠也許是同樣情況。除 VEGF120 和 VEGF121 外，VEGF 的其 他亞型都含有基本的肝素結(jié)合區(qū)域，且不能自由擴散。小鼠 VEGF164 與相應(yīng)的大 鼠蛋白氨基酸享有 97%的同源性;與人或豬的 VEGF 同源性為 89%，與牛 VEGF 同源性 為 88%，與貓、馬及犬的 VEGF 的同源性為 90%。VEGF 在多種細胞和組織中表達，包 括骨骼肌和心肌細胞、肝細胞、成骨細胞、中性粒細胞、巨噬細胞、角質(zhì)形成細胞、棕色脂肪細胞、CD34+ 干細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維素細胞、血管平滑肌細胞等等。VEGF 的表達受到缺氧和細胞因子的誘導，包括 IL-1、IL-6、IL-8、抑瘤素 M（oncostatin M）和腫瘤壞死因子α等。在發(fā)育過程和成體中，VEGF 亞型的表達也是不同的。

VEGF 的二聚體與兩個相關(guān)的酪氨酸激酶受體相結(jié)合，即 VEGF R1(也叫 FLt-1) 和 VEGF R2(Flk-1/KDR) 。VEGF 與受體的結(jié)合可誘導后者同型二聚體化和自磷酸化。這些受體擁有 7 個胞外的類免疫球蛋白域。血管內(nèi)皮細胞和一些非內(nèi) 皮細胞都有 VEGF 受體的表達。盡管 VEGF 與 VEGF R1 的親和力最高，但 VEGF R2 卻是調(diào)控 VEGF 的血管生產(chǎn)活性的主要因子。VEGF165 也結(jié)合臂板蛋白（semaphoring）受體、神經(jīng)纖毛蛋白 1（neuropilin-1），由此促進與 VEGF R2 的復合體形成。

VEGF 因其參與血管生成而著稱。在胚胎發(fā)育過程中，VEGF 調(diào)控內(nèi)皮細胞的增殖、 遷移和生存，并由此調(diào)控血管的密度、體積，但對于血管形成的格局并不起作 用。VEGF 通過成骨細胞和軟骨細胞的招募促進骨骼的形成，它同時也是一個單核細胞 趨化因子。在產(chǎn)后，VEGF 維持血管內(nèi)皮細胞的完整性, 并且是大/小血管內(nèi)皮 細胞的有效絲裂劑。在成體中，VEGF 主要在傷口修復和女性的生殖周期發(fā)揮作用。 在疾病組織中，VEGF 促進血管的通透性。因此，VEGF 通過促進外滲和腫瘤血管生成， 參與了腫瘤的轉(zhuǎn)移過程。針對阻斷 VEGF 活性的各種治療策略正在被用于控 制由 VEGF 誘導的腫瘤血管生成。體內(nèi)循環(huán)的 VEGF 水平與自身免疫行疾?。ㄈ珙?風濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡）的病征程度相關(guān)。