目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>免疫學(xué)試劑>>ELISA>> abs510010Human MMP-9 ELISA KIT
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96T |
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貨號 | abs510010 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
檢測原理:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術(shù)。特異性抗人MMP-9抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本和生物素化的檢測抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的MMP-9與固相抗體和檢測抗體結(jié)合,形成免疫復(fù)合物。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物,避光顯色。加入終止液終止反應(yīng),在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。
檢測類型:雙抗夾心法
形式:預(yù)包被96孔板
檢測樣本類型:細(xì)胞上清液,血清,血漿
上樣量:100ul
試劑盒組分:
預(yù)包被96孔板、標(biāo)準(zhǔn)品、MMP-9檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液(A、B)、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。
靈敏度:0.156ng/mL
檢測范圍:31.2 - 2,000 pg/mL
回收率范圍:85-104%
保存方法:2-8℃
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖
背景:
基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)也被稱為matrixins,是鋅鈣依賴性蛋白水解酶家族成員,可分解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM),在不同的亞細(xì)胞環(huán)境中,參與多種分子的加工過程。MMPs在眾多生理學(xué)進程中發(fā)揮重要功能,例如胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、繁殖以及組織重構(gòu)。也參與炎癥以及自身免疫疾病,例如關(guān)節(jié)炎、癌癥和心血管疾病。新合成的MMPs的量主要在轉(zhuǎn)錄水平被調(diào)節(jié),已經(jīng)存在的MMPs的蛋白水解活性,不僅受控于酶原的活性,也受控于內(nèi)源性抑制劑對酶活性的抑制,例如α2-巨球蛋白,以及金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)。
MMP-9(也稱明膠酶B、92kDa IV型膠原酶、92kDa明膠酶、V型膠原酶)作為糖基化酶原被分泌出來。酶原的活化涉及到N-末端前體區(qū)域的蛋白水解去除,終形成82kDa的活性酶。活性人MMP-9與小鼠和大鼠的MMP-9分別有72%和74%的氨基酸序列同源性。除了鋅結(jié)合位點,催化結(jié)構(gòu)域還包含三個連續(xù)的纖連蛋白II型同源單位,可結(jié)合明膠。富含脯氨酸的鉸鏈區(qū)將催化結(jié)構(gòu)域連接到C-末端血紅素樣結(jié)構(gòu)域。在體外實驗中,酶原經(jīng)4-氨基苯基乙酸乙酯(APMA)處理后,不僅能產(chǎn)生活性酶,還能產(chǎn)生活性與其相當(dāng)?shù)?span style="font-size:14px !important">C-末端截短形式。MMP-9可降解ECM中的成分,尤其對變性膠原(明膠)有非常高的特異性。MMP-9也可裂解III、IV、V、XI型膠原,以及彈性蛋白、巢蛋白-1 和玻連蛋白。MMP-9還可裂解多種趨化因子和生長因子(例如IL-1β、CXCL8/IL-8、CXCL7、CXCL4、CXCL1、Latent TGF-β、膜結(jié)合TNF-α、VEGF和FGF basic),β-淀粉樣蛋白、P物質(zhì)、髓鞘堿性蛋白。此動作可提高或降低這些可溶性因子的生物活性,也可使它們從與ECM的聯(lián)合中被釋放出來。MMP-9也可通過各種各樣的膜蛋白觸發(fā)信號通路,或是誘導(dǎo)它們從細(xì)胞膜上脫落從而抑制信號通路(例如CD44,E-鈣黏蛋白、整合素、ICAM-1和IL-2 Rα)。
MMP-9由多種正常細(xì)胞和轉(zhuǎn)化細(xì)胞產(chǎn)生,包括中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞、纖維原細(xì)胞、破骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、角化細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞。它影響生理性和病理性的血管生成和血管重構(gòu)。活化的中性粒細(xì)胞釋放MMP-9前體,不結(jié)合TIMP-1,允許促血管生成的FGF-2從ECM中釋放出來。MMP-9和TIMP-1的復(fù)合物不能誘導(dǎo)FGF-2的釋放。中性粒細(xì)胞來源的MMP-9可加劇炎癥反應(yīng),通過產(chǎn)生來自膠原多肽來誘導(dǎo)額外的中性粒細(xì)胞MMP-9的釋放。MMP-9在骨形成和重構(gòu)、誘導(dǎo)行為敏化與應(yīng)答、神經(jīng)元突觸重構(gòu)的調(diào)控、著床過程中的滋養(yǎng)層入侵、絲氨酸蛋白酶抑制劑α1的活化中也發(fā)揮重要作用。MMP-9介導(dǎo)的粘附分子的脫落對于腫瘤細(xì)胞的侵襲也有直接作用。
MMP-9的循環(huán)水平在許多炎癥失調(diào)疾病中有所升高,包括管腔內(nèi)血栓的形成、動脈粥樣硬化、克羅恩氏病、丙型肝炎病毒感染、結(jié)腸直腸癌以及杜氏肌營養(yǎng)不良。MMP-9與TIMP-1的比例在多發(fā)性硬化癥血清和囊性纖維化痰中升高,但在巨細(xì)胞病毒感染的血清中降低。游離MMP-9的水平、MMP-9與脂質(zhì)運載蛋白-2/NGAL復(fù)合物的水平分別在卵巢癌患者、子宮尿道感染患者的尿液中升高。
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