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CHIR99021 (同義名：CHIR99021, CHIR 911, CT99021, GSK-3 Inhibitor XVI）是一種、高特異性的GSK-3抑制劑。其對GSK3α和GSK3β的IC50分別為10 nM和6.7 nM。 CHIR99201對CDKs沒有交叉反應(yīng)性，對GSK-3β的選擇性是對CDKs選擇性的350倍。

      GSK-3是一種絲/蘇氨酸類蛋白激酶，其活性受自身磷酸化水平的影響，它負(fù)反饋調(diào)節(jié)胰島素介導(dǎo)的葡萄糖內(nèi)穩(wěn)態(tài)和糖原合成。普遍存在于哺乳動物細(xì)胞內(nèi)。GSK-3zui早在兔骨骼肌的分離提取物中被分離出來，主要有兩種亞型，即GSK-3α和GSK-3β，二者在催化區(qū)域具有98%的同源性，于N-和C-末端略有不同。二者的結(jié)構(gòu)相類似但是功能不相同，并且具有一定的組織特異性。GSK-3α主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)肝糖原的合成，而GSK-3β在胰島素敏感組織中具有一定的調(diào)節(jié)功能。除去zui早發(fā)現(xiàn)的調(diào)控糖原合成酶(GS) 的活性外，GSK-3β還能作用于眾多信號蛋白結(jié)構(gòu)蛋白和轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)細(xì)胞的分化、增殖、存活和凋亡。在癌癥神經(jīng)退行性疾病神經(jīng)精神類疾病等多種重大疾病的研究中，選擇其作為治療靶點(diǎn)，受到越來越多研究者的重視。

目前愛必信提供CHIR99021多種規(guī)格包裝，大包裝可詢價?，F(xiàn)貨供應(yīng)，歡迎訂購。

產(chǎn)品訂購信息：

基本特性： 

CAS號：252917-06-9， 分子式：C22H18Cl2N8， 分子量：465.34，外觀：粉劑 

結(jié)構(gòu)式：

產(chǎn)品描述：

CHIR99021（CHIR 911, CT99021）高特異性抑制GSK3β(IC50 = 6.7 nM) 和GSK3α (IC50 = 10 nM)。在CHO-IR細(xì)胞和分離的患有I型糖尿病的大鼠骨骼肌中，CHIR99021激活糖原合成。通過阻斷3T3-L1前脂肪細(xì)胞中C/EBP和PPARγ的誘導(dǎo)反應(yīng)，并模擬Wnt信號通路，CHIR99021抑制前脂肪細(xì)胞分化(IC50 = 0.3 μM)。與其他強(qiáng)效抑制GS3K和CDKs的抑制劑相比，如Alsterpaullone，kenpaullone，SB 214763和SB 415286，CHIR99021對GSK-3的選擇性比CDKs高350倍。在ST2細(xì)胞中，CHIR99021誘導(dǎo)造骨細(xì)胞芽生，提高細(xì)胞礦化，并抑制脂肪形成。已證實(shí)，CHIR99021可以誘導(dǎo)人和鼠的體細(xì)胞重新編程為干細(xì)胞。

溶解與保存： 

粉末直接保存于-20 ºC，DMSO溶解配制儲存液，建議分裝后-20ºC避光保存，避免反復(fù)凍存，至少可存放6個月。

使用濃度： 

CHIR99021的具體使用濃度請參考相關(guān)文獻(xiàn)，并根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)條件（如實(shí)驗(yàn)?zāi)康?，?xì)胞種類，培養(yǎng)特性等）進(jìn)行摸索和優(yōu)化。

應(yīng)用實(shí)例(僅作參考)：

   1）通過體外激酶實(shí)驗(yàn)，在3T3-L13 脂肪前體細(xì)胞中3μM CHIR 99021抑制GSK3可以激活Wnt信號通路并阻斷脂肪細(xì)胞轉(zhuǎn)化。1μM CHIR 99021會*阻斷脂肪細(xì)胞分化，大約0.3μM CHIR 99021可以抑制一半脂肪細(xì)胞分化。

   2）在ZDF大鼠中，口服一份劑量（30mg/kg）的CHIR99021會快速降低血糖水平，同時在之后的3-4hzui多會減少大約150mg/dl。

   3）在對GSK-3抑制劑誘導(dǎo)染色體不穩(wěn)定性研究中，10μM CHIR99021會顯著降低BubR1的分布，并作用于著絲粒間的距離。

重要應(yīng)用：

   1）‘2i’ medium (two inhibitors: PD 0325901，CHIR99021)-胚胎干細(xì)胞

以cocktail的形式加入ESCs細(xì)胞的培養(yǎng)基內(nèi)，能防止細(xì)胞分化和維持ESCs的自我更新。 Ying Q.L., et al. (2008) 等發(fā)現(xiàn)，相比較于PD184352，使用抑制MEK強(qiáng)度更高但是具相同選擇性的小分子化合物PD 0325901，僅需要和CHIR99021聯(lián)合培養(yǎng)，就能夠充分維持ESCs的自我更新。

‘2i’使用濃度： 1.0 μM PD 0325901 + 3 μM CHIR99021

文獻(xiàn)資料：

Ying QL, et al. The ground state of embryonic stem cell self-renewal. Nature. 453(7194):519-23 (2008). 

Nichols J, et al. Suppression of Erk signalling promotes ground state pluripotency in the mouse embryo. Development. 136(19):3215-22 (2009).

Complete 2i medium-50 mL

2） ‘3i’ (three inhibitors: PD184352，CHIR99021，SU 5402) medium—小鼠胚胎干細(xì)胞

以cocktail的形式加入ESCs培養(yǎng)基內(nèi)，能夠?qū)崿F(xiàn)小鼠胚胎干細(xì)胞的體外長期擴(kuò)增,并維持分化潛能。 Ying QL, et al. (2008) 等以N2B27 medium或preformulated NDiff N2B27 base medium為基礎(chǔ)，加入三種小分子，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的多種ESCs許多周內(nèi)都能夠持續(xù)性擴(kuò)增。比較于傳統(tǒng)的LIF+血清/BMP培養(yǎng)方法，‘3i’培養(yǎng)條件下細(xì)胞不僅翻倍擴(kuò)增，而且未分化細(xì)胞量維持在原來的90%以上。

‘3i’使用濃度： 0.8 μM PD184352 + 3 μM CHIR99021+ 2 μM SU5402

文獻(xiàn)資料：

Ying QL, et al. The ground state of embryonic stem cell self-renewal. Nature. 453(7194):519-23 (2008). 

Kiyonari H, et al. Three Inhibitors of FGF Receptor, ERK, and GSK3 Establishes Germline-Competent Embryonic Stem Cells of C57BL/6N Mouse Strain With High Ef?ciency and Stability. Genesis. 48(5):317-27 (2010).

3）Three inhibitors (PD 0325901，CHIR99021，A 83-01) 培養(yǎng)方法—human/rat iPSCs

以cocktail的形式加入iPSCs細(xì)胞的培養(yǎng)基內(nèi)，可以抑制iPSCs 的分化，維持自我更新和提高擴(kuò)增效率。 Li W, et al. (2009)等使用飼養(yǎng)層培養(yǎng)rat iPSCs，將3種小分子加入含LIF的mESC medium中，實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞長期和同源化的自我更新。

3種小分子使用濃度： 0.5 μM PD 0325901 + 3 μM CHIR99021 + 0.5 μM A83-01

文獻(xiàn)資料：Li W, et al. Generation of rat and human induced pluripotent stem cells by combining genetic reprogramming and chemical inhibitors. Cell Stem Cell. 4(1):16-9 (2009).

4）YPAC (four inhibitors: Y-27632, PD 0325901，CHIR99021，A 83-01) 條件培養(yǎng)方法—胚胎干細(xì)胞

以cocktail的形式加入傳統(tǒng)培養(yǎng)基內(nèi)，維持干細(xì)胞的多潛能。Kawamata M.等使用飼養(yǎng)層培養(yǎng)大鼠ESCs，將4種小分子抑制劑加入含LIF或 不含LIF的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，體外培養(yǎng)囊胚擴(kuò)展的ESCs并維持多潛能性。

YPAC使用濃度：10 μM Y-27632, 1 μM PD0325901, 0.5 μM A-83-01, and 3 μM CHIR99021 

文獻(xiàn)資料：Kawamata M., et al. Generation of genetically modified rats from embryonic stem cells. Proc Natl Acad Sci U S A. 107(32):14223-8(2010). 

Kawamata M, et al. Two distinct knockout approaches highlight a critical role for p53 in rat development. Sci Rep. 2:945 (2012).

愛必信還可提供其他GSK-3靶點(diǎn)相關(guān)抑制劑，產(chǎn)品信息：

愛必信特色產(chǎn)品線：

生化試劑（60萬種）、抗體（10萬種）、細(xì)胞因子、二抗、預(yù)制膠、ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、激動劑、抑制劑、凋亡試劑盒、BSA、動植物提取物、蛋白酶K、血清、組化筆...

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