大家都知道,胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)界的“香餑餑",備受胞胞們的“寵愛",其實(shí)還有一個(gè)“香煎餅",大家可知道?對(duì)一些“挑食"的細(xì)胞,馬血清可謂是散發(fā)著一股“煎餅的清香"。
圖1 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989)
一、馬血清的第一大功能是“滋養(yǎng)"一些特別的細(xì)胞,如免疫細(xì)胞類、成纖維細(xì)胞類、上皮細(xì)胞類、神經(jīng)細(xì)胞類等。需要添加馬血清的常見細(xì)胞類型如下:
1)NK(人外周血自然殺傷細(xì)胞)和NK-92(人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞)
營(yíng)養(yǎng)體系:74% α-MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9506)+ 0.2mM Inositol(abs816057)+ 0.1mM β-mercaptoethanol(abs9592)+ 0.02mM Folic Acid(abs812845)+ 100-200U/mL recombinant IL-2(abs04045)+ 12.5 %馬血清優(yōu)級(jí)(abs989)+ 12.5% 胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+ 1% 雙抗(abs9244)
2)EL-4(小鼠胸腺淋巴瘤細(xì)胞)
營(yíng)養(yǎng)體系:89% DMEM高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9483)+ 10% 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989)+ 1% 雙抗(abs9244)
3)L929(小鼠成纖維細(xì)胞)和CRFK(貓腎細(xì)胞)
營(yíng)養(yǎng)體系:89% MEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9503)+ 10% 馬血清優(yōu)級(jí)(abs989)+ 1% 雙抗(abs9244)
4)MCF 10A(人正常乳腺上皮細(xì)胞)
營(yíng)養(yǎng)體系:94% DMEM/F12基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9561)+ 5% 馬血清(abs989)+ 1% 雙抗(abs9244)+ 20ng/ml EGF(abs04176)+ 0.5ug/ml 氫化可的松Hydrocortisone(abs814512)+ 100ng/ml 霍亂霉素choleratoxin+10ug/ml 胰島素insulin(abs42225219)
5)PC-12(Undifferentiated)(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化))
營(yíng)養(yǎng)體系:79% RPMI1640基礎(chǔ)培養(yǎng)基(abs9484)+ 15% 馬血清(abs989)+ 5% 胎牛血清優(yōu)級(jí)(abs972)+ 1% 雙抗(abs9244)
二、馬血清第二大功能是誘導(dǎo)分化作用,有文獻(xiàn)報(bào)道【1】馬血清在 5-氮雜胞苷誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞成肌細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮重要作用。
該研究如下:將第1代長(zhǎng)滿100 mm培養(yǎng)皿的脂肪干細(xì)胞傳代至3個(gè)6孔板,實(shí)驗(yàn)組培養(yǎng)基中加入體積分?jǐn)?shù)為 5% 馬血清 +10 μmol/L 5-氮雜胞苷;對(duì)照組培養(yǎng)基中單純添加 10 μmol/L 的 5-氮雜胞苷;空白組為單純低糖 DMEM 培養(yǎng)基,其余培養(yǎng)、傳代及鑒定所需的條件相同。每日光鏡觀察記錄形態(tài),在培養(yǎng)的第 7、14、28、35 天行免疫熒光和流式細(xì)胞儀檢測(cè)肌蛋白表達(dá)差異。
該文獻(xiàn)的結(jié)果與結(jié)論是免疫熒光檢測(cè)成肌特異性胞質(zhì)蛋白表達(dá)以及流式細(xì)胞檢測(cè)相應(yīng)蛋白表達(dá)率提示,加入馬血清后的實(shí)驗(yàn)組脂肪干細(xì)胞的成肌速度和誘導(dǎo)成肌所需時(shí)間明顯比單純加入 5-氮雜胞苷的對(duì)照組更有優(yōu)勢(shì)。實(shí)驗(yàn)初步表明馬血清在促進(jìn)脂肪干細(xì)胞誘導(dǎo)成肌方面起著縮短誘導(dǎo)成肌所需時(shí)間的作用。
同時(shí),馬血清在誘導(dǎo) C2C12(小鼠成肌細(xì)胞)分化為多核肌管方面也發(fā)揮重大作用。C2C12 細(xì)胞是由 D·Yaffe 和 O·Saxel 建立的小鼠成肌細(xì)胞株的亞克??;該細(xì)胞分化很快,形成可伸縮的肌管并生成特征性的肌蛋白。將狀態(tài)良好的骨骼肌細(xì)胞以 0.9×105 接種在96孔板上(每孔100ul),置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h 后,待細(xì)胞融合到 70-80% 后,更換成的含有 2% 馬血清的培養(yǎng)基中,進(jìn)行誘導(dǎo)分化。(如圖2所示)
圖3 C2C12(小鼠成肌細(xì)胞)向多核肌管方向分化
另外,也有文獻(xiàn)報(bào)道【2】傳代培養(yǎng)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(P3)在 20% 馬血清的 L-DMEM 培養(yǎng)液中可分化為脂肪細(xì)胞。
此外, 10% 馬血清可代替 FBS 用于支持綿羊紅細(xì)胞的體外抗體應(yīng)答; 血清 IgG 制備,白蛋白的提取及生物活性研究;免疫組化(IHC)、酶聯(lián)免疫(ELISA)等免疫實(shí)驗(yàn)的封閉劑。
參考文獻(xiàn)
【1】劉杰,傅強(qiáng).馬血清在脂肪干細(xì)胞成肌誘導(dǎo)中的作用[J].中國(guó)組織工程研究, 15(14)
【2】趙文靜,陳亞潔,劉薇.人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志.2006.16(18):2744-2747
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表 細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品推薦
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 |
abs981 | 胎牛血清(特級(jí)) | 500ml |
abs972 | 胎牛血清(優(yōu)級(jí)) | 500ml |
abs974 | 胎牛血清(標(biāo)準(zhǔn)級(jí)) | 500ml |
abs9483 | 高糖DMEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9484 | RPMI-1640培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9505 | MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9506 | α-MEM培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9554 | Ham's F-12培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9563 | Ham's F-12K培養(yǎng)基 | 500ml |
abs9561 | DMEM/F-12培養(yǎng)基 | 500ml |
abs962 | PBS緩沖液 | 500ml |
abs970 | D-PBS緩沖液(不含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs971 | D-PBS緩沖液(含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs9257 | Hanks平衡鹽溶液(不含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs9258 | Hanks平衡鹽溶液(含 Ca2+ Mg2+) | 500ml |
abs47014938 | 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%) ,含酚紅 | 100ml |
abs47047375 | 胰蛋白酶-EDTA消化液(0.25%),不含酚紅 | 100mL |
abs9479 | 無DMSO無血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9417 | 無血清細(xì)胞凍存液 | 100mL |
abs9473 | 細(xì)胞凍存液(含血清) | 100mL |
abs9474 | 組織保存液 | 100ml |
abs9480 | 組織凍存試劑盒 | 30ml |
abs9486 | 模具 | 1個(gè)/套 |
abs9487 | 小刀 | 5片/包 |
abs9481 | 組織復(fù)蘇試劑盒 | 50ml |
abs42020125 | 卡那霉素B硫酸鹽 | 250mg |
abs42018967 | 硫酸慶大霉素溶液 | 10ml |
abs9244 | 青鏈雙抗 | 100ml |
abs9245 | 青霉素-鏈霉素-慶大霉素混合溶液 | 100ml |
abs42013298 | 兩性霉素B | 1g |
abs44071148 | 制霉菌素 | 1g |
abs9246 | 青霉素-鏈霉素-兩性霉素B混合溶液 | 100ml |
abs9252 | 支原體檢測(cè)試劑盒 | 100T |
abs9375 | 支原體清除試劑 | 200uL×5 |
abs9376 | 支原體預(yù)防 | 500uL×4 |
abs816578 | 環(huán)丙沙星鹽酸鹽 | 500mg |
abs9374 | 水盤抑菌劑 | 20ml |
abs9371 | 水浴鍋抑菌劑 | 100ml |
abs9372 | 培養(yǎng)箱除菌劑 | 480ml |
abs9373 | 細(xì)胞房除菌劑 | 480ml |
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
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