科研實(shí)驗(yàn)中我們經(jīng)常需要配制各種濃度的試劑。例如細(xì)胞實(shí)驗(yàn)一般需要加入小分子激動(dòng)劑/抑制劑;分子轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)一般會(huì)加入抗生素;免疫實(shí)驗(yàn)需要加入免疫刺激物/免疫佐劑等。這些昂貴的試劑濃度一旦計(jì)算錯(cuò)誤,不僅挑燈夜戰(zhàn)得來(lái)的數(shù)據(jù)毀于一旦,早日發(fā)文的愿望也隨之破滅,可謂一失足成千古恨。今天小愛(ài)就為大家解決這一難題,讓我們學(xué)會(huì)快速換算試劑濃度,擺脫科研失誤。
案例一
抑制劑儲(chǔ)存液配制
我們買(mǎi)來(lái)的小分子抑制劑一般是凍干粉,需要把它配制成溶液。首先,我們應(yīng)該知道藥物的分子量、溶解度以及規(guī)格。如果是毫克級(jí)小包裝,一般不需要稱量分裝,直接在原瓶中溶解配成儲(chǔ)存液。
以ROCK抑制劑Y-27632為例,產(chǎn)品信息如下:
CAS號(hào) | 規(guī)格 | 分子量 | 可溶性/溶解性 |
146986-50-7 | 5mg | 247.34 | DMSO:≥ 32mg/mL (129.38mM) |
該藥物推薦溶劑DMSO,同時(shí),最大只能配成129.38mM的儲(chǔ)存液。這一點(diǎn)非常重要。有些人沒(méi)有注意藥物溶解性,直接在非水溶性藥物中加入PBS配置,結(jié)果藥物不溶,“損失慘重"。
假如我們需要配置10mM儲(chǔ)存液,計(jì)算公式如下:
質(zhì)量(mg)= 濃度(mM)x 體積(L)x 分子量 (1)
5(mg)= 10(mM)x ?(L)x 247.34
即向含5mg Y-27632的原瓶中加入2.02mL DMSO,即可配制成10mM溶液。(注:此處要預(yù)估原瓶的容量,如果原瓶容量小于2 mL,應(yīng)考慮配置更大濃度的儲(chǔ)存液,如20mM,加入1.01 mL DMSO)。
此外,我們也會(huì)經(jīng)常遇到質(zhì)量濃度和摩爾濃度單位轉(zhuǎn)換,同樣以10mM Y-27632為例:
10mM=10mmol/L,化合物分子量為247.34,即247.34g/mol=247.34mg/mmol
10mmol/L x 247.34mg/mmol = 2473.4mg/L= 2.4734mg/mL
即10mM Y-27632溶液相當(dāng)于2.4734mg/mL
濃度快速換算法則:
1)mM轉(zhuǎn)換mg/mL,摩爾濃度數(shù)值乘以分子量再除以1000;
2)mg/mL轉(zhuǎn)換mM,質(zhì)量濃度數(shù)值除以分子量再乘以1000。
案例二
抑制劑儲(chǔ)存液稀釋
我們買(mǎi)來(lái)抑制劑的凍干粉,配制儲(chǔ)存液的濃度為10mM,如果需要使用終濃度為25uM進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn),需要加入多少抑制劑儲(chǔ)存液呢?記住下面這個(gè)稀釋公式就可以了:
起始濃度 x 起始體積 = 最終濃度 x 最終體積
C1(mM) x V1(mL)= C2(mM)x V2(mL) (2)
首先,
注意單位,我們假設(shè)最終體積為2mL,代入公式:
10(mM)x V1(mL)= 0.025(mM)x 2(mL)
即我們需要吸取5uL的儲(chǔ)存液進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。
案例三
百分比濃度換算
我們?cè)谑褂枚蛱K糖醇(DTT)做實(shí)驗(yàn)時(shí),會(huì)遇到這樣的問(wèn)題:已發(fā)表的文獻(xiàn)中使用0.1%的DTT溶液,而你購(gòu)買(mǎi)的DTT為1mol/L的儲(chǔ)存液,那么這該如何換算呢?請(qǐng)聽(tīng)小愛(ài)為您解答:
DTT的分子量為154,即154g/mol,儲(chǔ)存液換算成質(zhì)量濃度C1為
154g/mol x 1mol/L = 154g/L
假設(shè)需配制1L的0.1%DTT溶液,即V2 = 1L = 1000mL
0.1% DTT溶液為0.1g/100mL = 1g/1000mL = 1g/L,即C2 = 1g/L
再使用公式(2)C1 x V1 = C2 x V2 可得:
154(g/L)x V1(L)= 1(g/L)x 1(L)
V1 = 6.5mL,即吸取6.5mL 1mol/L的DTT儲(chǔ)存液,加入993.5mL稀釋液中即可獲得0.1%的DTT溶液。
如果我們購(gòu)買(mǎi)的是固體二硫蘇糖醇,配制0.1%的DTT溶液方法如下:精確稱取1g二硫蘇糖醇,用水定容至1000mL即可。
DL-二硫蘇糖醇科普
DL-二硫蘇糖醇(DL-Dithiothreitol,DTT)具有很強(qiáng)的還原性,其還原性很大程度上是由于其氧化狀態(tài)六元環(huán)(含二硫鍵)的構(gòu)象穩(wěn)定性。DTT有抗氧化作用,它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán),維持還原性環(huán)境,穩(wěn)定酶的活性。DTT中還含有一定RNA酶抑制劑,具有抑制RNA酶活性的作用。具有巰基乙醇相似的作用,但DTT的刺激性氣味要小很多,毒性也比巰基乙醇低很多。用作蛋白質(zhì)巰基保護(hù)劑和蛋白質(zhì)二硫鍵的裂解和順序分析。
DL-二硫蘇糖醇應(yīng)用:
※ 作為牛奶中主要過(guò)敏原αs1-酪蛋白的還原和烷基化反應(yīng)物之一;
※ 作為精子去膜和再激活培養(yǎng)基的一個(gè)組分;
※ 因硫醇可有效保護(hù)生物催化劑的活性位點(diǎn)而維持酶的穩(wěn)定性;
※ 作為還原劑用于測(cè)試N-乙基馬來(lái)酰亞胺與巰基反應(yīng)的特異性。
產(chǎn)品信息:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨期 |
abs9226 | DTT溶液(1mol/L) | 5mL | 現(xiàn)貨 |
abs47002083 | DL-二硫蘇糖醇(>98%,BR級(jí)) | 5g/25g | 現(xiàn)貨 |
abs42017588 | DL-二硫蘇糖醇(>97%) | 1g/5g | 現(xiàn)貨 |
小分子抑制劑產(chǎn)品推薦:
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨期 |
abs810012 | Brefeldin A | 10mg/25mg | 現(xiàn)貨 |
abs812852 | PMSF | 50mg/100mg/200mg | 現(xiàn)貨 |
abs810003 | U0126 | 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs810466 | Cisplatin | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810001 | LY 294002 | 10mg/25mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs812864 | Y-27632 | 5mg/10mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs812972 | Poly(I:C) | 10mg/50mg | 1-2周 |
abs810008 | SP600125 | 10mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810744 | Erastin | 5mg/10mg/50mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs817419 | Suramin Sodium Salt | 25mg | 現(xiàn)貨 |
abs817348 | IBMX | 25mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs810006 | Staurosporine | 5mg/25mg | 現(xiàn)貨 |
abs812846 | Geneticin (G418 Sulfate) | 250mg/500mg | 現(xiàn)貨 |
abs810030 | Rapamycin | 5mg/10mg/100mg/1g | 現(xiàn)貨 |
abs810575 | 3-Methyladenine | 25mg/50mg/200mg/500mg | 現(xiàn)貨 |
abs819421 | Prostaglandin E2 | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs817025 | Capsaicin | 25mg/50mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs810009 | SB202190(FHPI) | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810016 | Cyclosporin A | 5mg/25mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810010 | PD 98059 | 5mg/10mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs819747 | Nigericin sodium salt | 5mg/10mg/25mg | 現(xiàn)貨 |
abs812975 | Monensin sodium salt | 25mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs810716 | Doxorubicin hydrochloride | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810020 | Paclitaxel | 5mg/10mg/25mg/50mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs810481 | SB-431542 | 5mg/10mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810640 | Y-27632 2HCl | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs812033 | Leupeptin Hemisulfate | 5mg/10mg/25mg | 現(xiàn)貨 |
abs817902 | Pepstatin A | 10mg/25mg/50mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs811913 | GsMTx4 | 1mg/5mg | 現(xiàn)貨 |
abs814916 | Gastrin I (human) | 1mg/5mg | 現(xiàn)貨 |
abs817694 | A-83-01 | 5mg/10mg/25mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810052 | CHIR-99021(CT99021) | 5mg/25mg | 現(xiàn)貨 |
abs810473 | DAPT | 5mg/10mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810530 | Dorsomorphin free base | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
abs810050 | Forskolin | 5mg/25mg/100mg | 現(xiàn)貨 |
abs816969 | Nicotinamide | 50mg/100mg/200mg/500mg | 現(xiàn)貨 |
abs810009 | SB202190(FHPI) | 5mg/50mg | 現(xiàn)貨 |
溫馨提示:Absin所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究,請(qǐng)勿藥物、家用或其他用途。
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關(guān):ECL發(fā)光液、預(yù)染marker、預(yù)制膠;IHC相關(guān):二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動(dòng)劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標(biāo)簽抗體、對(duì)照抗體;定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...
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