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類器官原代培養(yǎng)全流程

閱讀:1018      發(fā)布時間:2022-11-17
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準備工作
1.儀器設備
CO2 培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺、倒置顯微鏡、臺式冷凍離心機、水浴鍋、水浴搖床,醫(yī)用冰箱、-80°冰箱、移液器(一套)、眼科剪、眼科鑷。

2.試劑耗材
小腸類器官培養(yǎng)基,小腸類器官消化液,小腸組織保存液,小腸類器官緩沖液,硫酸慶大霉素,雙抗,組織固定液,基質膠,60mm細胞培養(yǎng)皿, 100μm濾篩,15ml離心管,1.5ml EP管若干,4度冰盒,眼科剪刀,眼科鑷。

 

操作流程
1.類器官操作流程之——樣本準備
(1)將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中,4℃從醫(yī)院/實驗室取回。
(2)將取樣瓶消毒,組織取出放入培養(yǎng)皿樣本拍照,并登記,大小,顏色,軟硬程度,組織類型等信息。


2. 類器官操作流程之——清洗-剪碎

添加含有雙抗、慶大霉素的類器官緩沖液浸泡,用眼科鑷刮去腸道粘膜,腸絨毛等。在培養(yǎng)皿中用類器官緩沖液清洗三次(每次更換培養(yǎng)皿)后剪碎,剪成大約1mm3的組織塊。靜置2次。


3. 類器官操作流程之——消化-過濾
(1)用組織消化液在37℃進行消化10-15min(消化過程中隨時觀察消化情況)。
(2)類器官緩沖液終止消化,用槍頭輕柔吹打可以看到液體變渾濁。


(3)使用100μm孔徑的篩網(wǎng)進行過濾,取少量濾液在鏡下進行觀察,可以看到明顯的隱窩狀組織結構。


4. 類器官操作流程之—離心、加膠。

基質膠計算:第3步后觀察收集到的組織體積,添加25倍組織體積的基質膠。

5. 類器官操作流程之——鋪板

加500-750μl 類器官培養(yǎng)基培養(yǎng)


6.類器官操作流程之——觀察


 

 

本期推薦
類器官培養(yǎng)基試劑盒

培養(yǎng)簡單:培養(yǎng)基集成多種因子,無需添加其他因子和再優(yōu)化;

擴增效率高:培養(yǎng)的類器官能夠快速增長;

維持穩(wěn)定傳代:維持至少3代以上擴增,部分類器官每次傳代可實現(xiàn)10代以上擴增;

性價效益比:按照GMP級別生產(chǎn)條件下制備,批次質量穩(wěn)定,價格優(yōu)勢明顯。

 貨號

  品名

  規(guī)格

  abs9446

  Organotial乳腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

  abs9448

  Organotial子宮內(nèi)膜癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

  abs9445

  Organotial結直腸癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

  abs9444

  Organotial肝癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

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  abs9443

  Organotial肺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

  abs9449

  Organotial胃癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

  abs9447

  Organotial胰腺癌類器官培養(yǎng)基試劑盒

  1kit

 
基質膠

  貨號

  品名

  規(guī)格

  周期

abs9410

  即用型基質膠

  100ml

  現(xiàn)貨

abs9490

  基質膠(標準型、含酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9491

  基質膠(標準型、無酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9492

  基質膠(高濃度、含酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9493

  基質膠(高濃度、無酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9494

  基質膠(低因子、含酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9495

  基質膠(低因子、無酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9496

  基質膠(IPS驗證無酚紅)

  1.5ml*4

  現(xiàn)貨

abs9497

  基質膠(高濃度、低因子、含酚紅)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

abs9498

  基質膠(高濃度,無酚紅,低生長因子)

  1.5ml*8

  現(xiàn)貨

 
Absin特色產(chǎn)品線:
WB相關:ECL發(fā)光液、預染marker、預制膠;IHC相關:二抗試劑盒、組化筆;IP/CoIP試劑盒;激動劑/抑制劑;血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE;凋亡試劑盒;呼吸爆發(fā)試劑盒;ELISA試劑盒;重組蛋白;抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體;定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...


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