什么是內(nèi)切酶? 限制性內(nèi)切酶是一類能夠識(shí)別雙鏈 DNA 分子中特定核苷酸序列(4~8 bp),并于特定部位切割 DNA 雙鏈的脫氧核糖核酸內(nèi)切酶。核心屬性是能夠準(zhǔn)確切割 DNA,并形成完整的切割末端。DNA純度、緩沖液、溫度條件及限制性內(nèi)切酶本身都會(huì)影響限制性內(nèi)切酶的活性。 選擇和使用內(nèi)切酶時(shí)要注意什么? 1. 選擇的酶在底物DNA上必須至少有一個(gè)相應(yīng)的識(shí)別位點(diǎn)。識(shí)別堿基數(shù)目少的酶比堿基數(shù)目多的酶更頻繁地切割底物。 2. 內(nèi)切酶的產(chǎn)物可以是粘端的(3'或5'突出端),也可以是平端的片段。粘端產(chǎn)物可以與相容的其它內(nèi)切酶產(chǎn)物連接,而所有的平端產(chǎn)物都可以互相連接。 3. 內(nèi)切酶拿出冰箱后應(yīng)當(dāng)立即置于冰上。 4. 吸取酶時(shí)必須更換移液槍頭 5. 加入酶之前所有的其它反應(yīng)物都應(yīng)當(dāng)已經(jīng)加好并已預(yù)混合,最后將酶加入到反應(yīng)體系中。酶的用量視在底物上的切割頻率而定。要求在冰上操作。 什么是快速內(nèi)切酶? Absin快速內(nèi)切酶是一系列經(jīng)過基因工程重組、能夠在5~15分鐘內(nèi)精確完成DNA切割的限制性內(nèi)切酶,適用于質(zhì)粒DNA、PCR產(chǎn)物或基因組DNA等的快速酶切。
Absin快速內(nèi)切酶特點(diǎn): 1.5-15min內(nèi)即可完成酶切。 2.極低星號(hào)活性,特殊的蛋白與菌株改造方案,配合優(yōu)異的純化團(tuán)隊(duì)與體系化的生產(chǎn)工藝,可以達(dá)到極低的星號(hào)活性,超長時(shí)間孵育仍無亂切現(xiàn)象 3.共用一種酶切Buffer,大大簡化酶切反應(yīng)體系;同時(shí)兼容下游實(shí)驗(yàn),減少清潔步驟,更加省時(shí)省力。 4.良好的酶活冗余度,輕松應(yīng)對(duì)底物過量或困難模板酶切; 5.酶切完畢后可直接點(diǎn)膠電泳。緩沖液,提供紅色版本反應(yīng)緩沖液, 6.愛必信生物去磷酸化、連接試劑在配套的Buffer中具有100%活性,支持一管化反應(yīng),提升“酶切-修飾-連接"的體驗(yàn)。
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