支原體是一種大小僅為0.2~0.3 um,無細(xì)胞壁,可透過一般過濾膜(0.22-0.45 um)的原核生物,在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,支原體感染發(fā)生率達(dá)到63%,是細(xì)胞培養(yǎng)中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養(yǎng)基、血清或?qū)嶒灢僮髡?,會影響?xì)胞生長率、細(xì)胞形態(tài)、基因表達(dá)、細(xì)胞代謝和細(xì)胞活力。支原體感染不易察覺,因此對培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測就非常重要。
那如何確定細(xì)胞是被支原體污染呢?
1、細(xì)胞形態(tài)改變
支原體污染比較嚴(yán)重時可出現(xiàn)生長減慢,有的培養(yǎng)基pH明顯變酸,并出現(xiàn)細(xì)胞病變,以此可依次對支原體污染進(jìn)行檢測,但有些情況下支原體污染引起的病變特征與病毒感染相似,因此不能準(zhǔn)確診斷。
2. 試劑盒檢測法:
愛必信支原體染色檢測試劑盒可用于在培養(yǎng)細(xì)胞中對支原體或其它原核生物進(jìn)行原位染色檢測。主要用于檢測培養(yǎng)細(xì)胞中是否存在支原體污染。
培養(yǎng)細(xì)胞中的細(xì)菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光學(xué)顯微鏡下可見,但支原體污染在光學(xué)顯微鏡下不可見,必須通過特定的檢測方法進(jìn)行檢測。
檢測支原體污染的方法有很多種,包括支原體分離培養(yǎng)、支原體特異酶檢測、RT-PCR檢測以及DNA熒光染色檢測。該試劑盒是通過Hoechst染色來檢測支原體,可快速、有效、高靈敏度地檢測支原體污染。
如果發(fā)現(xiàn)有支原體污染,建議更換無污染的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。該試劑盒如用于六孔板樣品檢測,至少可以檢測100個樣品。
3 細(xì)胞間隙存在不動小黑點
如何預(yù)防支原體感染?
定期檢測:支原體感染會使培養(yǎng)細(xì)胞慢慢枯萎,因此對培養(yǎng)細(xì)胞定期進(jìn)行支原體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應(yīng)該進(jìn)行一次支原體檢測。將定期支原體檢測常規(guī)化堅持下去,是細(xì)胞培養(yǎng)實驗室應(yīng)對支原體感染的關(guān)鍵。使用愛必信支原體預(yù)防劑,可以有效的排除血清、培養(yǎng)基中可能存在的支原體,非抗生素類:多肽類,無耐藥性,無二次污染:隨著培養(yǎng)時間的延長,會被緩慢降解為氨基酸,可用于大規(guī)模發(fā)酵、細(xì)胞治療等領(lǐng)域,且細(xì)胞毒性小,已在多種細(xì)胞上進(jìn)行過驗證??梢苑判氖褂?/span>
如發(fā)現(xiàn)細(xì)胞已經(jīng)感染,如何清除支原體感染?
使用愛必信支原體清除試劑可以有效抑制和清除在培養(yǎng)細(xì)胞中廣泛存在的支原體污染。一方面可以用于消除細(xì)胞中已有的支原體污染,也可以用于防止支原體污染。 本試劑是一種篩選獲得的天然抗生素,抑制或清除支原體時的濃度比較低,對細(xì)胞沒有毒性。和細(xì)胞培養(yǎng)時所常用的青霉素和鏈霉素那樣,對細(xì)胞的各種檢測沒有干擾。可以有效抑制并清除實驗室常見支原體,包括 Mycoplasma orale, M. arginini, M. hyorhinis和Acholeplasma laidlawii。通常在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入本試劑約一周即可有效抑制或清除支原體。
相關(guān)產(chǎn)品:
名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
支原體染色檢測試劑盒 | abs9252 | 100T |
支原體清除劑 | abs9375 | 200ul; 200uL×5 |
支原體預(yù)防劑 | abs9376 | 500ul; 500uL×4 |
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