1.準(zhǔn)備總氮試劑

偏堿過(guò)硫酸鉀的制備過(guò)程非常重要。如果掌握不好，會(huì)影響消化性能和測(cè)定結(jié)果。關(guān)于偏堿過(guò)硫酸鉀的制備，簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)就是將過(guò)硫酸鉀和氫氧化鈉溶解在水中，不做其他要求。事實(shí)上，過(guò)硫酸鉀的溶解速度非常慢。如果想加速溶解速度，千萬(wàn)不要盲目加熱。即使加熱，最好采用水浴加熱法，水浴溫度必須低于60℃，否則，過(guò)硫酸鉀就會(huì)分解失效。制備溶液時(shí)，可分別稱(chēng)量過(guò)硫酸鉀和氫氧化鈉，分別制備，然后混合容量，或先制備氫氧化鈉溶液，待溫度降至室溫后倒入過(guò)硫酸鉀溶解。如果兩者都溶解在量杯中的水中，應(yīng)慢慢加水，同時(shí)混合，避免氫氧化鈉放熱引起的溶液溫度過(guò)高，導(dǎo)致局部過(guò)硫酸鉀失效。

2.玻璃容器的清洗

使用前應(yīng)使用玻璃容器(1)9)硫酸浸泡，然后用氨水洗幾次。否則，空白值會(huì)很高或平面度會(huì)很差。

3.消化溫度和壓力的控制

在使用醫(yī)用手持式蒸汽滅菌器的實(shí)驗(yàn)室中，壓力為1.1~1.4kg/cm2，溫度為120℃~124℃。在消化過(guò)程中，當(dāng)達(dá)到規(guī)定的溫度和壓力時(shí)，需要開(kāi)始計(jì)時(shí)。我的一般經(jīng)驗(yàn)是直接打開(kāi)氣閥，加熱一段時(shí)間。當(dāng)蒸汽滅菌器中的冷空氣排出，熱蒸汽釋放后，關(guān)閉排氣閥，控制消除溫度為123℃。

4.比色注意事項(xiàng)

該項(xiàng)目的測(cè)量涉及兩個(gè)波長(zhǎng)(220)nm和275nm）。建議在測(cè)量一組樣品的相同波長(zhǎng)后，調(diào)整到另一個(gè)波長(zhǎng)進(jìn)行統(tǒng)一測(cè)量。在更換另一個(gè)樣品之前，無(wú)需測(cè)量一個(gè)樣品的兩個(gè)吸光率，因此反復(fù)的波長(zhǎng)調(diào)整會(huì)導(dǎo)致一定的測(cè)量誤差。

5.選用總氮試劑

過(guò)硫酸鉀是偏堿過(guò)硫酸鉀消除紫外分光光度法的重要試劑。

首先，試劑的純度與空白值和測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性有關(guān)。

一般分析純過(guò)硫酸鉀總氮含量不超過(guò)0.005%。但由于試劑質(zhì)量的差異，一些廠(chǎng)家和批次的試劑氮含量通常不能滿(mǎn)足這一要求，導(dǎo)致空白值較高。

因此，如果條件允許，建議使用優(yōu)質(zhì)純?cè)噭?，盡量減少試劑中的氮含量，從而降低實(shí)驗(yàn)的空白值。