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上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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Pan02-CAG-tTA-4B3使用說明書現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好，同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購(gòu)！
資源名稱 Pan02-CAG-tTA-4B3使用說明書
種屬 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞（B類）
形態(tài) 多角
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+2.0ug/mlpuromycin
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
詳細(xì)說明
描述 轉(zhuǎn)染pCAG-tTA質(zhì)粒，經(jīng)2.0ug/mlpuromycin篩選，為Tet-off穩(wěn)定調(diào)控細(xì)胞系，受強(qiáng)力霉素Dox調(diào)控倍數(shù)在20~50倍。細(xì)胞倍增時(shí)間為24小時(shí)。
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
使用權(quán)限 B類
冷凍保存方法一：冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二：冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下，再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過1小時(shí)，以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中，但存活率稍微降低一些。
Pan02-CAG-tTA-4B3使用說明書操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
Pan02-CAG-tTA-4B3使用說明書注意事項(xiàng)：
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁，若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力，如果證實(shí)細(xì)胞活力正常，請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng)；如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力，請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們，信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用，細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合，使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。100807-100 杜氏 PBS 緩沖液 ,10× 100mL
90707-50 動(dòng)植物總蛋白微量提取試劑盒 50 次
D013-1 動(dòng)植物種屬鑒定 1 個(gè)樣
91204-50 動(dòng)植物膜蛋白微量制備試劑盒 50 次
131128F-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6 100 次
131128E-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 5 100 次
131128D-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 4 100 次
131128C-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 3 100 次
131128B-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 2 100 次
131128A-100 動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 1 100 次
130891-50 動(dòng)物線粒體總蛋白提取劑盒 50 次
111207B-15 動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 精提 ) 15 次
111207A-15 動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 粗提 ) 15 次
80807B-50 動(dòng)物細(xì)胞裂解液 B 50mL
80807A-50 動(dòng)物細(xì)胞裂解液 A 50mL
90613-25 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 25 次
90613-100 動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒 100 次
21-0050-5 動(dòng)物上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 5mL
3070-100 動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 100mL
3070-250 動(dòng)物 RNAout(TRIzol) 250mL
3670-100 動(dòng)物 DNAout 100mL
3670-250 動(dòng)物 DNAout 250mL
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