詳細(xì)介紹
GCT0404優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱(chēng) GCT0404優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨
種屬 人骨巨細(xì)胞瘤細(xì)胞
提供形式 P4-5代T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%RPMI-1640+10%FBS
生長(zhǎng)條件 95%空氣+5%二氧化碳 37攝氏度
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
存儲(chǔ)條件 50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
詳細(xì)說(shuō)明
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲(chǔ)存。-20℃不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
GCT0404優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時(shí)可以一定比例和客戶(hù)自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。CAS59-02-9 維生素 E 5g
CAS59-02-9 維生素 E 5g
CAS590-46-5 甜菜堿鹽酸鹽 100g
CAS590-46-5 甜菜堿鹽酸鹽 100g
CAS590-46-5 甜菜堿鹽酸鹽 100g
CAS59-05-2 氨甲喋呤 10mg
CAS59-05-2 氨甲喋呤 10mg
CAS59-05-2 氨甲喋呤 10mg
CAS59-14-3 5- 溴 -2'- 脫氧尿苷 100mg
CAS59-14-3 5- 溴 -2'- 脫氧尿苷 100mg
CAS59-14-3 5- 溴 -2'- 脫氧尿苷 100mg
CAS59-23-4 D- 半乳糖 25g
CAS59-23-4 D- 半乳糖 25g
CAS59-23-4 D- 半乳糖 25g
CAS59-30-3 葉酸 5g
CAS59-30-3 葉酸 5g
CAS59-30-3 葉酸 5g
CAS5934-29-2 L- 組氨酸鹽酸鹽 25g
CAS5934-29-2 L- 組氨酸鹽酸鹽 25g
CAS5934-29-2 L- 組氨酸鹽酸鹽 25g
CAS593-84-0 異硫氰酸胍 25g
CAS593-84-0 異硫氰酸胍 25g
CAS593-84-0 異硫氰酸胍 25g
CAS59-43-8 維生素 B1 10g
CAS59-43-8 維生素 B1 10g
CAS59-43-8 維生素 B1 10g
CAS596-09-8 二乙酸熒光素 1g
CAS596-09-8 二乙酸熒光素 1g
CAS596-09-8 二乙酸熒光素 1g
CAS59-67-6 煙酸 25g
CAS59-67-6 煙酸 25g
CAS59-67-6 煙酸 25g
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS59865-13-3 環(huán)孢霉素 A 5mg
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS5989-81-1 α- 乳糖 100g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS59-92-7 3-(3,4- 二羥基苯 )-L- 丙氨酸 5g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-00-4 乙二胺四乙酸 (EDTA) 100g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-18-4 L- 酪氨酸 25g
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-24-2 β- 巰基乙醇 100mL
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS60-31-1 氯化乙酰膽堿 1g
CAS604-44-4 4- 氯 -1- 萘酚 5g