產(chǎn)品簡介
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
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KYSE30優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!
資源名稱 KYSE30優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨
種屬 人食管鱗癌細(xì)胞
提供形式 P4-5代T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%F-12+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度
生長特性 貼壁生長
存儲條件 90%FBS+10%DMSO 液氮
詳細(xì)說明
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
KYSE30優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
KYSE30優(yōu)質(zhì)現(xiàn)貨注意事項:
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時多數(shù)細(xì)胞均會貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請用臺盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細(xì)胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
6. 該細(xì)胞只能用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。CAS50-81-7 抗壞血酸 25g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-78-2 乙酰水楊酸 100g
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-76-0 放線菌素 D 1mg
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-70-4 D- 山梨醇 250g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS50-69-1 D- 核糖 5g
CAS504-17-6 β- 硫代巴比妥酸 5g
CAS504-17-6 β- 硫代巴比妥酸 5g
CAS504-17-6 β- 硫代巴比妥酸 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS504-15-4 苔黑素 5g
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-02-2 地塞米松 100mg
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS50-01-1 鹽酸胍 100g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS493-52-7 甲基紅 5g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS485-47-2 茚三酮 10g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS477-73-6 番紅 O 5g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4618-18-2 乳果糖 1g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g
CAS4578-31-8 5'- 單磷酸腺苷二鈉 5g