詳細介紹
EC9706使用說明書操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
資源名稱 EC9706使用說明書
種屬 人食管癌細胞
提供形式 P4-5代T25培養(yǎng)瓶細胞
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基 90%RPMI-1640+10%FBS
生長條件 95%空氣+5%二氧化碳37攝氏度
生長特性 貼壁生長
存儲條件 50% RPMI-1640+40%FBS+10%DMSO 液氮
詳細說明
冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃300分鐘→(-20℃30分鐘*)→-80℃16~18小時(或隔夜)→液氮槽長期儲存。
冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3℃至–80℃以下,再放入液氮槽期儲存。-20℃不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,也可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,但存活率稍微降低一些。
EC9706使用說明書注意事項:
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng),隔天再取出觀察。此時多數(shù)細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們,信息確認后我們?yōu)槟倜赓M寄送一次。
4. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
5. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術部溝通交流。
6. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。CAS64-75-5 鹽酸四環(huán)素 5g
CAS64-75-5 鹽酸四環(huán)素 5g
CAS64-75-5 鹽酸四環(huán)素 5g
CAS64-69-7 碘乙酸 5g
CAS64-69-7 碘乙酸 5g
CAS64-69-7 碘乙酸 5g
CAS64485-93-4 噻孢霉素 5g
CAS64485-93-4 噻孢霉素 5g
CAS64485-93-4 噻孢霉素 5g
CAS64431-96-5 1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷 5g
CAS64431-96-5 1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷 5g
CAS64431-96-5 1,3-二[三(羥甲基)甲氨基]丙烷 5g
CAS64285-73-0 3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸 1g
CAS64285-73-0 3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸 1g
CAS64285-73-0 3,3’,5,5’- 四甲基聯(lián)苯胺二鹽酸 1g
CAS63-91-2 L- 苯丙氨酸 10g
CAS63-91-2 L- 苯丙氨酸 10g
CAS63-91-2 L- 苯丙氨酸 10g
CAS63-68-3 L- 甲硫氨酸 25g
CAS63-68-3 L- 甲硫氨酸 25g
CAS63-68-3 L- 甲硫氨酸 25g
CAS6363-53-7 麥芽糖 100g
CAS6363-53-7 麥芽糖 100g
CAS6363-53-7 麥芽糖 100g
CAS636-00-0 6- 羥基多巴胺 5g
CAS636-00-0 6- 羥基多巴胺 5g
CAS636-00-0 6- 羥基多巴胺 5g
CAS633-03-4 亮綠 5g
CAS633-03-4 亮綠 5g
CAS633-03-4 亮綠 5g
CAS632-69-9 玫瑰紅鈉鹽 5g
CAS632-69-9 玫瑰紅鈉鹽 5g
CAS632-69-9 玫瑰紅鈉鹽 5g
CAS62669-70-9 羅丹明 123 5mg
CAS62669-70-9 羅丹明 123 5mg
CAS62669-70-9 羅丹明 123 5mg
CAS62625-32-5 溴甲酚綠 1g
CAS62625-32-5 溴甲酚綠 1g
CAS62625-32-5 溴甲酚綠 1g
CAS62610-50-8 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B 100mL
CAS62610-50-8 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B 100mL
CAS62610-50-8 交聯(lián)瓊脂糖凝膠 6B 100mL
CAS62-56-6 硫脲 25g
CAS62-56-6 硫脲 25g