產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | RecombinantDeoxyribonucleaseI?LikeProtein3(DN |
物種 | Musmusculus(Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
13(KLK13)卵白蛋白偶聯(lián)
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-17 13:12:57瀏覽次數(shù):137
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | RecombinantDeoxyribonucleaseI?LikeProtein3(DN |
物種 | Musmusculus(Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 物種 |
DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白 | Recombinant Deoxyribonuclease I Like Protein 3 (DNASE1L3 | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
DHP2; DNAS1L3; LSD; Deoxyribonuclease Gamma; Liver and spleen DNase; DNase I homolog protein DHP2 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來(lái)源:原核表達(dá) 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 分泌 預(yù)測(cè)分子量:33.9kDa 實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū)) 片段與標(biāo)簽:Val51~Ser310 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):8.9 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
肝素酶(HPSE)卵白蛋白偶聯(lián)物 英文名稱(chēng):OVA Conjugated Heparanase (HPSE)
(PP)卵白蛋白偶聯(lián)物 英文名稱(chēng):OVA Conjugated Pepsin (PP)
胰彈性蛋白酶(ELA1)卵白蛋白偶聯(lián)物 英文名稱(chēng):OVA Conjugated Pancreatic Elastase 1 (ELA1)
補(bǔ)體成分9(C9)卵白蛋白偶聯(lián)物 英文名稱(chēng):OVA Conjugated Complement Component 9 (C9)
(KLK13)卵白蛋白偶聯(lián)物 英文名稱(chēng):OVA Conjugated Kallikrein 13 (KLK13)
注意事項(xiàng):
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白 英文名稱(chēng):Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)
Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅲ for the Fc region of FcγRⅢ Elisa Kit 96T/48T
c段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G, FcγRⅡ Elisa Kit 96T/48T
Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G, FcγRⅠ Elisa Kit 96T/48T
人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒 Human granulocyte chemotactic protein-2, GCP-2 Elisa Kit 96T/48T
人糖基化依賴(lài)的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1, GlyCAM-1 Elisa Kit 96T/48T
人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒 Human interferon Regulatory Factor, IRF Elisa Kit 96T/48T
人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinβ, LTB Elisa Kit 96T/48T
人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒 Human lymphotoxinα, LTA Elisa Kit 96T/48T
DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白人CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒 Human CC-chemokine receptor 1, CCR1 Elisa Kit 96T/48T
人CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒 Human CX3C-chemokine receptor 1, CX3CR1 Elisa Kit 96T/48T
人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒 Human pulmonary activation regulated chemokine, PARC Elisa Kit 96T/48T
人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒 Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1, MAdCAM-1 Elisa Kit 96T/48T