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DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白

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更新時(shí)間:2023-03-17 13:12:57瀏覽次數(shù):137

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) RecombinantDeoxyribonucleaseI?LikeProtein3(DN
物種 Musmusculus(Mouse,小鼠) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品肝素酶(HPSE)卵白蛋白偶聯(lián)物物種:Homo sapiens (Human,人)胰彈性蛋白酶(ELA1)卵白蛋白偶聯(lián)物物種:Homo sapiens (Human,人)補(bǔ)體成分9(C9)卵白蛋白偶聯(lián)物物種:Homo sapiens (Human,人)
13(KLK13)卵白蛋白偶聯(lián)

詳細(xì)介紹

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

物種

DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白

Recombinant Deoxyribonuclease I Like Protein 3 (DNASE1L3

Mus musculus (Mouse,小鼠)

商品介紹:

DHP2; DNAS1L3; LSD; Deoxyribonuclease Gamma; Liver and spleen DNase; DNase I homolog protein DHP2 酶與激酶    

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)    

來(lái)源:原核表達(dá)    

宿主E.coli    

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)    

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞核, 分泌  

預(yù)測(cè)分子量:33.9kDa    

實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))    

片段與標(biāo)簽:Val51~Ser310 with N-terminal His Tag    

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.    

性狀:凍干粉    

純度:> 95%    

等電點(diǎn):8.9    

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.    

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg    


蛋白表達(dá)及純化:


1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png

相關(guān)產(chǎn)品:

肝素酶(HPSE)卵白蛋白偶聯(lián)物   英文名稱(chēng):OVA Conjugated Heparanase (HPSE)    

(PP)卵白蛋白偶聯(lián)物   英文名稱(chēng):OVA Conjugated Pepsin (PP)    

胰彈性蛋白酶(ELA1)卵白蛋白偶聯(lián)物   英文名稱(chēng):OVA Conjugated Pancreatic Elastase 1 (ELA1)    

補(bǔ)體成分9(C9)卵白蛋白偶聯(lián)物   英文名稱(chēng):OVA Conjugated Complement Component 9 (C9)    

(KLK13)卵白蛋白偶聯(lián)物   英文名稱(chēng):OVA Conjugated Kallikrein 13 (KLK13)    

注意事項(xiàng):

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時(shí)間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類(lèi)以及組織塊的大小來(lái)調(diào)整固定時(shí)間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時(shí)間過(guò)久會(huì)導(dǎo)致組織變脆,切片時(shí)易碎。因此固定時(shí)間通常不宜超過(guò) 24 小時(shí)。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進(jìn)行免疫組化檢測(cè)時(shí),有時(shí)需要對(duì)抗原先進(jìn)行修復(fù),然后才能進(jìn)行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對(duì)人體有害,操作時(shí)請(qǐng)小心,并注意有效防護(hù)以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作                                            

操作步驟:

實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2  100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.51 mLLysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mLLysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL


5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

614,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白   英文名稱(chēng):Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)    

Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒     Human Receptor Ⅲ for the Fc region of FcγRⅢ Elisa Kit    96T/48T    

c段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒     Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G, FcγRⅡ Elisa Kit    96T/48T    

Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒     Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G, FcγRⅠ Elisa Kit     96T/48T    

人粒細(xì)胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒   Human granulocyte chemotactic protein-2, GCP-2 Elisa Kit     96T/48T    

人糖基化依賴(lài)的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒     Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1, GlyCAM-1 Elisa Kit    96T/48T    

人干擾素調(diào)節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒     Human interferon Regulatory Factor, IRF Elisa Kit    96T/48T    

人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒     Human lymphotoxinβ, LTB Elisa Kit    96T/48T    

人淋巴毒素α(LTA)ELISA試劑盒     Human lymphotoxinα, LTA Elisa Kit    96T/48T    

DNA樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白CC趨化因子受體1(CCR1)ELISA試劑盒   Human CC-chemokine receptor 1, CCR1 Elisa Kit    96T/48T    

CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒   Human CX3C-chemokine receptor 1, CX3CR1 Elisa Kit    96T/48T    

人肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISA試劑盒     Human pulmonary activation regulated chemokine, PARC Elisa Kit    96T/48T    

人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISA試劑盒   Human mucosal addressin cell adhesion molecule-1, MAdCAM-1 Elisa Kit    96T/48T    

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