詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9918
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促卵泡刺抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CDH2 N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-DES (Thr76/Thr77) 磷酸化結蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
PVDF膜(26.5×37.5cm 0.2um) 1張 Millipore
ZFAND5 英文名稱: AN1型鋅指蛋白5抗體 0.2ml
Dermcidin 英文名稱: 蛋白DCD抗體 0.1ml
CDH2 N-Cadherin / CD325 / CDH2 兔單抗 (PE) Human
IL-2 大鼠白介素-2Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
DcR1/TNFRSF10C 壞死因子配體超家族成員10CMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEK6 高度相似的細胞周期蛋白激酶NEK6抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Thyroxine-Binding Globulin Assay,TBG ELISA Kit 人甲狀腺結合球蛋白 96T
TBR1 英文名稱: TBR1蛋白抗體 0.2ml
C3a Receptor/C3aR 英文名稱: 過敏C3受體/補體C3受體抗體 0.1ml
DcR1/TNFRSF10C 壞死因子配體超家族成員10CMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat rat IgG/RBITC 羅丹明標記的羊抗大鼠IgG 0.3ml
FBXW12 英文名稱: FBXW12蛋白抗體 0.2ml
原活化蛋白激酶1/2抗體 ERK2/ERK 0.1ml
PEG3/FITC 熒光素標記PEG3蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Ser396) 磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
Goat human Fibrinogen/Gold 金標記羊抗人纖維蛋白原(10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格: 2ml
大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞;PC-12APC蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次鹿內皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒,
細胞CDK2蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次兔子透明質酸(HA)ELISA試劑盒,
載玻片細胞CDK2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次植物赤霉素(GA) ELISA試劑盒,
凍切片組織CDK2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次煌綠黃嘧啶瓊脂用于沙門氏菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
石蠟切片組織CDK2蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次FMOC-L-纈
載玻片細胞APC蛋白表達CDK2顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次D-半胱鹽酸一水化合物
凍切片組織APC蛋白表達CDK2顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次2,3-二氨基萘
石蠟切片組織APC蛋白表達CDK2顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人肺表面活性物質相關蛋白D(SP-D)ELISA試劑盒, SP-D ELISA kit
細胞CDK2蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次人葉酸(FA)ELISA試劑盒,FA ELISA
細胞CDK2蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次人胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒,
CDK2蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次人血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA試劑盒,
CDK2蛋白共沉淀分析試劑盒5次小鼠CD19分子(CD19)ELISA試劑盒,
CDK2蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次小鼠活化素A(ACV-A)ELISA試劑盒,
細胞CDK3蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次小鼠破骨分化因子(ODF)ELISA試劑盒,
載玻片細胞CDK3蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒,