產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type II |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 13:50:14瀏覽次數(shù):284
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type II |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
cGMP依賴性蛋白激酶Ⅱ(PRKG2)重組蛋白 | Recombinant Protein Kinase, cGMP Dependent Type II (PRKG2) | Homo sapiens (Human,人) |
商品介紹:
PRKGR2; cGKII; cGMP-dependent protein kinase 2 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞膜 預(yù)測分子量:61.8kDa 實際分子量:62kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Leu453~Leu728 with N-terminal His and GST Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:8.9 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
蛋白酶激活亞基3(PSME3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Activator Subunit 3 (PSME3)Homo sapiens (Human,人)
蛋白酶激活亞基4(PSME4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Activator Subunit 4 (PSME4)Homo sapiens (Human,人)
蛋白酶體亞基α1(PSMa1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 1 (PSMa1)Homo sapiens (Human,人)
蛋白酶體亞基α4(PSMa4)重組蛋白英文名稱:Recombinant Proteasome Subunit Alpha Type 4 (PSMa4)Homo sapiens (Human,人)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
phospho-AKT (Ser473)產(chǎn)品名稱: 蛋白激meiB單克隆抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
Chloride Channel 5產(chǎn)品名稱: 氯離子通道蛋白5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
應(yīng)用類型: Other英文名稱: PKC delta英文別名: MAY 1; MAY1; nPKC delta; PCKd; PKC d; PKC delta; PKC-d; PKCD; PKCdelta; PRKC D; PRKC delta; PRKC-d; PRKCd; Protein Kinase C delta; Protein kinase C delta type; Protein Kinase Cdelta; KPCD_HUMAN; PKC δ.
Keratin82產(chǎn)品名稱: 角蛋白82抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Inhibin beta A產(chǎn)品名稱: suβA/Inhibin βA抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Rabbit, Sheep
Fbxw7產(chǎn)品名稱: Fbxw7蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
BST2產(chǎn)品名稱: 骨髓基質(zhì)干細胞抗原2抗體交叉反應(yīng): Human
CD321交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse
APLP2產(chǎn)品名稱: 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse
VGLUT2產(chǎn)品名稱: 囊泡谷氨suan轉(zhuǎn)運蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse
cGMP依賴性蛋白激酶Ⅱ(PRKG2)重組蛋白人胍基丁胺脲水解mei(AGMAT)ELISA試劑盒AGMAT胍基丁胺脲水解meielisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Agmatine Ureohydrolase(AGMAT)ELISA Kit
人鈷胺傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)ELISA試劑盒TCN2鈷胺傳遞蛋白Ⅱelisa檢測試劑盒Human Transcobalamin II, Macrocytic Anemia(TCN2)ELISA Kit
人骨調(diào)蛋白(OMD)ELISA試劑盒OMD骨調(diào)蛋白elisa kitHuman Osteomodulin(OMD)ELISA Kit
人骨髓基質(zhì)細胞抗原2(BST2)ELISA試劑盒BST2骨髓基質(zhì)細胞抗原2ELISA試劑盒Human Bone Marrow Stromal Cell Antigen 2(BST2)ELISA Kit
人骨髓基質(zhì)細胞抗原1(BST1)ELISA試劑盒BST1骨髓基質(zhì)細胞抗原1elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Bone Marrow Stromal Cell Antigen 1(BST1)ELISA Kit