產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant p21 Protein Activated Kinase 1 (PAK1) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 13:49:06瀏覽次數(shù):265
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant p21 Protein Activated Kinase 1 (PAK1) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
商品介紹:
PAKalpha; p65-PAK; p21/Cdc42/Rac1-Activated Kinase 1; Serine/threonine-protein kinase PAK 1 酶與激酶 物種:Homo sapiens (Human,人) 來源:原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細(xì)胞定位::細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì), 染色體 預(yù)測分子量:31.7kDa 實際分子量:30kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標(biāo)簽:Glu252~Cys501 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 97% 等電點:5.7 應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
p21蛋白激活激酶1(PAK1)重組蛋白 | Recombinant p21 Protein Activated Kinase 1 (PAK1) | Homo sapiens (Human,人) |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品:
蛋白激酶N1(PKN1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase N1 (PKN1)Homo sapiens (Human,人)
蛋白激酶N2(PKN2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase N2 (PKN2)Homo sapiens (Human,人)
蛋白激酶R(PKR)活性蛋白英文名稱:Active Protein Kinase R (PKR)Homo sapiens (Human,人)
蛋白激酶R(PKR)重組蛋白英文名稱:Recombinant Protein Kinase R (PKR)Homo sapiens (Human,人)
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Deltex 1產(chǎn)品名稱: DTX1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Cow
HBZ產(chǎn)品名稱: 紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體交叉反應(yīng): Human, Rat, Dog, Pig, Goose, Chimpanzee
DPP1產(chǎn)品名稱: 組織蛋白meiC抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
RTN3產(chǎn)品名稱: 神經(jīng)特異性蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
GPRC5B產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
GSTA3產(chǎn)品名稱: S轉(zhuǎn)移meiA3抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit, Sheep
DDHD1產(chǎn)品名稱: 磷脂meiDDHD1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
Dnmt1產(chǎn)品名稱: DNA甲基轉(zhuǎn)移mei1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
SOX9產(chǎn)品名稱: 轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Rabbit
Tnni1產(chǎn)品名稱: 骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體交叉反應(yīng): Mouse, Rat
p21蛋白激活激酶1(PAK1)重組蛋白人胱天蛋白mei12(CASP12)ELISA試劑盒CASP12胱天蛋白mei12elisa kitHuman Caspase 12(CASP12)ELISA Kit
人光導(dǎo)蛋白(PDC)ELISA試劑盒PDC光導(dǎo)蛋白ELISA試劑盒Human Phosducin(PDC)ELISA Kit
人冠蛋白7(CORO7)ELISA試劑盒CORO7冠蛋白7elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human Coronin 7(CORO7)ELISA Kit
人冠蛋白6(CORO6)ELISA試劑盒CORO6冠蛋白6elisa檢測試劑盒Human Coronin 6(CORO6)ELISA Kit
人冠蛋白2B(CORO2B)ELISA試劑盒CORO2B冠蛋白2Belisa kitHuman Coronin 2B(CORO2B)ELISA Kit
注意事項:
1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作