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產(chǎn)品名稱:總抗氧化能力(ABTS法)測(cè)試盒規(guī)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、可見分光光度法
貨號(hào):YS-01S6394
測(cè)定意義
測(cè)定對(duì)象中各種抗氧化物質(zhì)和抗氧化酶等構(gòu)成總抗氧化水平。在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)研究中常常檢測(cè)血漿、血清、唾液、尿液等各種體液,細(xì)胞或組織等裂解液、植物或中草藥抽提液及各種抗氧化物(antioxidant)溶液的總抗氧化能力。
測(cè)定原理:
ABTS法是使用*泛的間接檢測(cè)方法,可用于親水性和親脂性物質(zhì)抗氧化能力測(cè)定。ABTS經(jīng)氧化后生成穩(wěn)定的藍(lán)綠色陽離子自由基 ABTS+,能溶于水相或酸性乙醇介質(zhì)中,在734nm處有最大吸收。被測(cè)物質(zhì)加入ABTS+溶液后,所含抗氧化成分能與ABTS+發(fā)生反應(yīng)而使反應(yīng)體系褪色。在734nm檢測(cè)吸光度的變化,并以Trolox作為對(duì)照體系量化抗氧化物質(zhì)的抗氧化能力。
自備實(shí)驗(yàn)用品:
恒溫水浴鍋、低溫離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來說,其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Anti-phospho-SHC (Tyr239/240)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
VTG(vitellogenin) 青鳉魚卵黃蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg
細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子抗體 Anti-NFKBp65 0.1ml
SCUBE1 英文名稱: 新型血小板相關(guān)血管內(nèi)皮分泌蛋白SCUBE1抗體 0.2ml
EV71 polyprotein VP1 英文名稱: 腸道病毒71型抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-p95 NBS1(Ser343) 磷酸化滑膜細(xì)胞凋亡抑制物1抗體 規(guī)格 0.1ml
VTG(vitellogenin) 青鳉魚卵黃蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1mg
FGF4/HSTF1/HBGF-4(Fibroblast Growth Factor4) 纖維母細(xì)胞生長因子4抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-E2F1 (Ser332) 磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 規(guī)格 0.1ml
纖維素膜(30cm×3m 0.45um) 1卷 Whatman
ZNF281 英文名稱: 鋅指蛋白281抗體 0.2ml
DEF6/IBP 英文名稱: 干擾素調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
腦鈉素/利鈉肽抗體 Anti-BNP 0.1ml
ZBTB7C 英文名稱: 鋅指蛋白ZBTB7C抗體 0.2ml
DNTNP 英文名稱: 背神經(jīng)管核蛋白抗體 0.2ml
膜粘連蛋白 Ⅱ抗體 Anti-Annexin Ⅱ 0.1ml
Anti-ZNF474/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指蛋白474抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ERK5(Ser496) 磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶5抗體 規(guī)格 0.1ml
DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多巴胺受體-D5抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
總抗氧化能力(ABTS法)測(cè)試盒規(guī)格二苯(BC)鹽酸左氧氟沙星甲R(shí)NA電泳上樣緩沖液(RNA酶保護(hù))
乙二乙酸銅二鈉鹽(>98%,BR)7-ACARNA樣品儲(chǔ)存液
5'-單磷酸腺苷(>95%,BR)利福霉素S純化RNA樣品儲(chǔ)存液
硫酸鋁十六水(>98%,BR)利福霉素BRNA酶溶液(RNA酶保護(hù)分析)
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶,硫酸銨懸浮液利福噴丁50倍Dendhart核酸雜交封閉溶液
蘋果酸脫氫酶(>12,000U/ml,BC)鹽酸加替沙星總微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒
N-羥基丁二酰亞(>98%,BR)卡那霉素B總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒
沒食子酸一水物(標(biāo)準(zhǔn)品)美洛西林鈉胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。