化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
細(xì)胞特性：
1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。
2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：髓系白血病單核細(xì)胞;THP-1
規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9742
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常
儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)步驟
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
注意事項(xiàng)：
（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；
（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。
（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。
（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。
（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟：
一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。
GDF8/MSTN(growth differntiation factor 8) 生長分化因子8抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
FCGR1 CD64 / FCGR1 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-DAG1 (Tyr892) 磷酸化肌相關(guān)蛋白DAG1抗體 規(guī)格 0.1ml
預(yù)染蛋白Marker分子量標(biāo)準(zhǔn)(1.7-40kDa) 2x250μl/50次 MBI原裝
Zfp91 英文名稱： 白血病相關(guān)新基因抗體 0.2ml
DCTN3 英文名稱： 動(dòng)力蛋白激活蛋白亞基3抗體 0.2ml
FCGR1 CD64 / FCGR1 鼠單抗 (PE) Human
IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素-6Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
D-DIMER 交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEEP21 NEEP21蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml
Human transthyretin,TTR ELISA Kit 人轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白 96T
TMEM158 英文名稱： 跨膜蛋白158抗體 0.2ml
Cancer testis antigen 65 英文名稱： /抗原65 0.2ml
D-DIMER 交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit human IgG whole serum 兔抗人IgG抗血清 1ml
FAU 英文名稱： 泛素樣核糖體蛋白S30/MNSF-β抗體 0.1ml
鼠抗人白細(xì)胞介素-2抗體 IL-2 0.2ml
Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記抗三聚氰胺抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-PTEN(Ser380) 磷酸化抑制基因PTEN抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit mouse IgG Whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
髓系白血病單核細(xì)胞;THP-15-氯-1，3-二甲基吡唑 10-姜酚酒類精（arginine）含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
甘氨脫氧膽酸鈉(進(jìn)分)10-羥基喜樹堿飲料精（arginine）含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量檢測(cè)試劑盒
?；蛆Z去氧膽酸鈉10-脫乙?；涂ǘ、笸ㄓ眯途╝rginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
甘氨脫氧膽酸(GDCA)11-氧-羅漢果皂甙V精（arginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
衣霉素 13-乙?；?9-羥基巴卡丁III組織精（arginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
吲哚-3-甲酸甲酯 1-脫氧野尻霉素血液精（arginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
甲溴東莨菪堿(標(biāo)準(zhǔn)品)2"-O-沒食子?；鸾z桃苷體液精（arginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
脫氧膽酸鈉；去氧膽酸鈉20(S)-人參皂苷 F1植物精（arginine）含量高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
化工儀器網(wǎng)