產(chǎn)品名稱:脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)
規(guī)格 : 10管/9樣、50管/48樣、25管/24樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào):YS-01S6343
測(cè)定意義
細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰輔酶和丙二酰輔酶而生成長(zhǎng)鏈脂肪酸。FAS普遍表達(dá)于各種組織細(xì)胞中,在哺乳動(dòng)物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達(dá)豐富。
測(cè)定原理
以NADPH為還原力,F(xiàn)AS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長(zhǎng)鏈脂肪酸;通過(guò)測(cè)定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。
實(shí)驗(yàn)中所需儀器和用品
研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說(shuō)明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
UTS2R/GPR14(Urotensin II receptor:G Protein Coupled Receptor 14) G蛋白偶聯(lián)受體14抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
Rhesus antibody Rh phospho-CSF1R(Tyr923) 磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 規(guī)格 0.1ml
考馬斯亮藍(lán)R-250蛋白快速染色液 250ml 自產(chǎn)
ZNF347 英文名稱: 鋅指蛋白347抗體 0.2ml
DAT1 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體 0.2ml
PLAUR PLAUR / CD87 / uPAR 鼠單抗 (PE) Human
PKA(Protein Kinase A) 蛋白激酶A(多肽)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-AKT3 (Ser472) 磷酸化蛋白激酶AKT3抗體 規(guī)格 0.1ml
Myosin skeltal,muscle 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Ulex Europaeus Lectin 1 英文名稱: 荊豆凝集素1抗體 0.1ml
DACH2 英文名稱: 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子DACH2抗體 0.2ml
Anti-Kir6.2 ATP敏感性鉀通道亞基kir6.2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Styk1 英文名稱: 絲酸/蘇酸/酪酸激酶STYK1抗體 0.2ml
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 英文名稱: 磷酸化雌受體ER alpha 抗體 0.1ml
src原癌基因抗體 Anti-SRC 0.2ml
Anti-Tie2/FITC 熒光素標(biāo)記上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨酸激酶2IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MAP4(Ser1046) 磷酸化微管相關(guān)蛋白4抗體 規(guī)格 0.1ml
ATF6(activating transcription factor 6) 活化轉(zhuǎn)錄因子6抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
脂肪酸合成酶(FAS)測(cè)試盒說(shuō)明書(shū)柚皮苷二氫查爾酮兔耳草凍切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
潮霉素B(羅氏原裝)祖師麻石蠟切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
芹菜苷; 芹黃苷蜜環(huán)菌粉 載玻片TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
酚-7-O-葡萄糖苷紅穿破石 凍切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
酚-4’-O-葡萄糖苷;酚-4’-O-β-D-葡萄糖苷海星 石蠟切片組織TUBULIN蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
柯伊利素-7-O-葡萄糖苷,野決明苷山綠茶 TUBULIN蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
山柰酚-3-O-蕓香糖苷(標(biāo)準(zhǔn)品)廣草 TUBULIN蛋白表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
泮托拉唑鈉一水物大黃(掌葉大黃) TUBULIN蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒