詳細介紹
產品名稱:過氧化氫(H2O2)試劑盒說明書
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、可見分光光度法
貨號:YS-01S6367
測定意義
H2O2是生物體內最常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細胞內核酸,蛋白質等生物大分子,并使細胞膜遭受損害,從而加速細胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應急反應中的關鍵調節(jié)因子。
測定原理:
H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復合物,在415nm有特征吸收。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。
【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ). 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對照測定有色樣品(如有必要調整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當?shù)娘@色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Anti-phospho-P53 (Ser15) /FITC 熒光素標記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
鈣結合蛋白抗體 Anti-CR 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標記的兔抗豬IgG 0.1ml
FANCM 英文名稱: 范可尼貧血相關蛋白M抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PI 3 Kinase p85 beta 磷脂酰肌醇激酶p85β抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-human IgM/ Biotin 生物素化小鼠抗人IgMMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
Caspase-1 人Caspase-1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
Anti-DBH 多巴胺β羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NETO1 腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml
Human visfatin ELISA Kit 人內脂素/內臟脂肪素 96T
Tubulin-Beta 英文名稱: 微管蛋白抗體(組化用抗體)Tubulin β 0.1ml
CARD14 英文名稱: 凋亡加強結構域蛋白14抗體 0.2ml
Anti-DBH 多巴胺β羥化酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
14-3-3 Tau 英文名稱: 14-3-3τ蛋白抗體 0.1ml
EGFR 英文名稱: 表皮生長因子受體抗體 0.1ml
磷脂酰肌醇激酶抗體 Anti-PI3K/P85 alpha 0.1ml
Anti-Phospho-Stat2 (Tyr690)/FITC 熒光素標記磷酸化信號轉導和轉錄激活因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-MYL9(Thr19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈9抗體 規(guī)格 0.1ml
Ang- II (Angiotensin II ) 血管緊張素II抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
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