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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP) |
| 物種 | Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白 | Recombinant Alkaline Phosphatase (ALP) | Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) |
商品介紹：
AKP; ALKP; Basic Phosphatase 酶與激酶 代謝通路 腫瘤免疫 感染免疫 肝膽病學 骨骼代謝 物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛) 來源：原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：細胞膜 預測分子量：39.2kDa 實際分子量：42kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：N-terminal His Tag 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：7.3 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關產(chǎn)品：
碳酸酐酶Ⅰ(CA1)重組蛋白Recombinant Furin (FUR)
肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白Recombinant Glyoxalase I (GLO1)
肽酶D(PEPD)重組蛋白Recombinant Glucocerebrosidase (GBA)
肽基脯氨酰異構酶F(PPIF)重組蛋白Recombinant Hyaluronan Synthase 1 (HAS1)
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
MCP4產(chǎn)品名稱: 單核細胞趨化蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit
FRYL產(chǎn)品名稱: FRYL蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Horse, Sheep
SOSSC產(chǎn)品名稱: 單鏈DNA結合蛋白相互作用蛋白1交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Rabbit
Calsequestrin產(chǎn)品名稱: 肌鈣集蛋白/收鈣su抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
human CD8/PE-Cy7產(chǎn)品名稱: PE-Cy7標記小鼠抗人CD8單克隆抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian
PADI4產(chǎn)品名稱: 相關基因抗體交叉反應: Human
HSBP1產(chǎn)品名稱: 熱休克因子結合蛋白1抗體交叉反應: Human, Bee
Desmocollin 2 + 3產(chǎn)品名稱: 橋粒糖蛋白2/橋粒糖蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse
Slc26a5產(chǎn)品名稱: 感覺神經(jīng)性常染色體隱性遺傳61抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit
Gas1產(chǎn)品名稱: 生長休止特定蛋白1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep
堿性磷酸酶(ALP)重組蛋白小鼠神經(jīng)細胞粘附分子1(NCAM1)ELISA試劑盒NCAM1神經(jīng)細胞粘附分子1ELISA試劑盒Mouse Neural cell adhesion molecule 1,NCAM1 ELISA kit
小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)ELISA試劑盒OMgp-Ab少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體elisamei聯(lián)免疫試劑盒Mouse anti-oligodendrocyte-myelin glycoprotein antibody,OMgp-Ab ELISA Kit
小鼠趨化因子配體1(CCL1)ELISA試劑盒CCL1趨化因子配體1elisa kitMouse chemokine (C-C motif) ligand 1 ELISA Kit
小鼠趨化因子5(CCL5/RANTES)ELISA試劑盒CCL5/RANTES趨化因子5ELISA試劑盒Mouse CCL5/RANTES ELISA Kit
小鼠葡萄糖調節(jié)蛋白78(GRP78)ELISA試劑盒GRP78葡萄糖調節(jié)蛋白78elisa檢測試劑盒Mouse Glucose Regulated Protein 78,GRP78 Elisa kit
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