化工儀器網
產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Granzyme M (GZMM) |
| 物種 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產品僅供科研使用，不得用于臨床！
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白 | Active Granzyme M (GZMM) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：10.3 應用：Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關產品：
精脒/精胺N1-乙?；D移酶1(SAT1)重組蛋白Recombinant Lysyl Oxidase Like Protein 3 (LOXL3)
精胺氧化酶(SMOX)重組蛋白Recombinant Hydroxyacid Oxidase 1 (HAO1)
精胺合酶(SMS)重組蛋白Recombinant TTK Protein Kinase (TTK)
精氨酰氨基肽酶(RNPEP)重組蛋白Recombinant Salt Inducible Kinase 2 (SIK2)
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Thrombin Activation peptide fragment 1產品名稱: 凝mei(凝因子II)激活肽1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, GuineaPig
SMAD5產品名稱: 細胞信號轉導分子SMAD5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, GuineaPig
C1ORF111產品名稱: 1號染色體開放閱讀框111抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
HMG4/HMGB3產品名稱: 高遷移率家族蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Cathepsin S產品名稱: 組織蛋白meiS抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
sLOX 1產品名稱: 可溶性凝集su樣氧化受體1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
Phospho-Mcl1 (Ser159 + Thr163)產品名稱: 髓樣細胞白-1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse
IGFL1產品名稱: 胰島su生長因子樣家族成員1抗體交叉反應: Human
SNTB2/Syntrophin-3產品名稱: 互養(yǎng)蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
NDRG3產品名稱: 抑基因NDRG3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Horse, Rabbit
顆粒酶M(GZMM)活性蛋白大鼠激肽原(KNG)ELISA試劑盒KNG激肽原elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat kininogen,KNG ELISA Kit
大鼠基質金屬蛋白mei14(MMP-14)ELISA試劑盒MMP-14基質金屬蛋白mei14elisa檢測試劑盒Rat Matrix Metalloproteinase 14,MMP-14 ELISA Kit
大鼠肌質網膜鈣ATPmei(SERCA)ELISA試劑盒SERCA肌質網膜鈣ATPmeielisa kitRat Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3 ELISA Kit
大鼠活性氧調制因子1(ROMO1)ELISA試劑盒ROMO1活性氧調制因子1ELISA試劑盒Rat Reactive oxygen species modulator 1,ROMO1 ELISA kit
大鼠活化suA受體抗體IgM(ACV-RAb IgM)ELISA試劑盒ACV-RAb IgM活化suA受體抗體IgMelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat anti-Activin A receptor antibody IgM,ACV-RAb IgM ELISA Kit
化工儀器網