甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：熱休克蛋白J2抗體Anti-CK3/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白3抗體IgG
雙特異性酪磷酸化調(diào)節(jié)酶1B抗體Anti-CK4/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白4抗體IgG
二?；视兔?抗體Anti-CK5/FITC 熒光素標(biāo)記角蛋白5抗體IgG
DNA依賴蛋白酶催化亞基抗體Anti-PCNA(phosphos Dyr211)/FITC 熒光素標(biāo)記兔

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X9996

細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

Trx/FITC 熒光素標(biāo)記硫氧還蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

血管內(nèi)皮生長因子抗體  VEGF 0.1ml

SDF1 英文名稱： 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1抗體 0.1ml

eIF6 英文名稱： β4整合素結(jié)合蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-IL-7Ra(Tyr449) 磷酸化白細(xì)胞介素-7受體a抗體 規(guī)格 0.1ml

CaMK2b(calcium/calmodulin-dependent protein kinase II beita) 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CTLA-4 小鼠細(xì)胞毒T細(xì)胞相關(guān)抗原4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 FGL2 凝血酶原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Mouse  Rabbit IgM/APC APC標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 規(guī)格 0.1ml

SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子 96T

SUMF1 英文名稱： 酯酶修飾因子1抗體 0.2ml

CDKAL1 英文名稱： 周期素依賴性激酶5調(diào)節(jié)蛋白1樣蛋白1抗體 0.2ml

 FGL2 凝血酶原酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  mouse IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgM 0.1ml

phospho-FGFR3 (Tyr724) 英文名稱： 磷酸化成纖維細(xì)胞生長因子受體3抗體 0.1ml

環(huán)子孢子蛋白抗體  CSP 1ml

 phospho-P53 (Thr81)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-YWHAE(Thr232) 磷酸化14-3-3E蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  dog IgG/Biotin 生物素化兔抗狗IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.3ml
甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒5次人髓鞘堿性蛋白抗體（MBP）ELISA試劑盒,MBP ELISA kit

非同位素辛化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交試劑盒5次人Ⅰ型前膠原N端前肽（PⅠNP）ELISA試劑盒,PⅠNP ELISA kit

非同位素HRP－DAB顯色法DNA南方雜交試劑盒5次人胃粘液素（GM）ELISA試劑盒,GM ELISA kit

非同位素AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒5次人抗DNA酶B抗體（anti-DNase B）ELISA試劑盒, anti-DNase B ELI

非同位素地AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交試劑盒5次人流感病A（FLU A）ELISA試劑盒, FLU A ELISA

電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒5次人苗條素受體（LR/Ob-R）ELISA試劑盒,LR/Ob-R ELISA

DNA狹縫雜交（SLOT BLOT）試劑盒5次人游離原卟啉（FEP）ELISA試劑盒, FEP ELISA

寡核苷酸探針同位素法DNA南方雜交*試劑盒5次人高密度脂蛋白（HDL）ELISA試劑盒,HDL ELISA

寡核苷酸探針非同位素HRP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交*試劑盒5次人基質(zhì)金屬蛋白酶11（MMP11）ELISA試劑盒,MMP11 ELISA

寡核苷酸探針非同位素AP化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交*試劑盒5次人基質(zhì)金屬蛋白酶3（MMP-3）ELISA試劑盒,

寡核苷酸探針非同位素辛化學(xué)發(fā)光法DNA南方雜交*試劑盒5次人一氧化碳血紅蛋白（HbCO）ELISA試劑盒,

寡核苷酸探針非同位素HRP－DAB顯色法DNA南方雜交*試劑盒5次人聚集蛋白（Agrin）ELISA試劑盒,

寡核苷酸探針非同位素AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交*試劑盒5次大鼠中性粒彈性蛋白酶（NE）ELISA試劑盒,

寡核苷酸探針非同位素地AP－BCIP/NBT法DNA南方雜交*試劑盒5次大鼠白活化黏附因子（ALCAM）ELISA試劑盒,

S1核酶保護(hù)法檢測(cè)試劑盒5次兔色素上皮衍生因子（PEDF）ELISA試劑盒,